[发明专利]白色念珠菌环介导等温扩增快速检测方法无效
| 申请号： | 200810157907.3 | 申请日： | 2008-10-15 |
| 公开（公告）号： | CN101381775A | 公开（公告）日： | 2009-03-11 |
| 发明（设计）人： | 雷质文;贺楠;姜英辉;刘云国;房保海;李正义;唐静;马维兴;张健;祝素珍;贾俊涛;赵丽青 | 申请（专利权）人： | 山东出入境检验检疫局检验检疫技术中心 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68;C12Q1/04 |
| 代理公司： | 青岛海昊知识产权事务所有限公司 | 代理人： | 张中南 |
| 地址： | 266002*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种白色念珠菌环介导等温扩增快速检测方法。其中的试剂包括环介导等温扩增反应液、Bst DNA聚合酶和显色剂；其中的反应液含有反应缓冲液、dNTP、硫酸镁、上游内引物5-CACATTTTGGATAAGGTTCACCATT-ATAGAAACCTCAAGATTTCCGT-3、下游内引物5-TCGTGTTCGTGAAAGTGAAGATAAT-CTTTCTATCATCCAAATCGTAGA-3、上游外引物5-ACCGTTGATTTCCAATTCG-3、下游外引物5-TTAACTTGAGCCATGGAGAT-3和甜菜碱；检测白色念珠菌的方法包括真菌DNA的提取、白色念珠菌的环介导等温扩增、显色检测。本发明的特点是快速、特异性强、灵敏度高而且成本低。 | ||
| 搜索关键词： | 白色 念珠菌 环介导 等温 扩增 快速 检测 方法 | ||
【主权项】：
1. 环介导等温扩增检测白色念珠菌的试剂，其特征是该试剂包括(1)-(4)：(1)环介导等温扩增反应液：包括10×Thermopol反应缓冲液、1.0—1.4mmol/L dNTP、4—10mmol/L硫酸镁(MgSO4)、0.8—1.6μmol/L上游引内物(FIP)、0.8—1.6μmol/L下游内引物(BIP)、0.2—0.3μmol/L上游外引物(F3)、0.2—0.3μmol/L下游外引物(B3)和1—1.5mol/L甜菜碱；其中10×Thermopol反应缓冲液含有200mmol/L pH8.8的三羟基甲基氨基甲烷—盐酸、100mmol/L氯化钾、100mmol/L硫酸铵、20mmol/L硫酸镁和1％曲拉通X—100；其中，上游内引物:5-CACATTTTGGATAAGGTTCACCATT-ATAGAAACCTCAAGATTTCCGT-3；下游内引物:5-TCGTGTTCGTGAAAGTGAAGATAAT-CTTTCTATCATCCAAATCGTAGA-3；上游外引物:5-ACCGTTGATTTCCAATTCG-3；下游外引物:5-TTAACTTGAGCCATGGAGAT-3；(2)UNG酶：1U/μL；(3)Bst DNA聚合酶：8U/μL；(4)显色剂：为10％的荧光染料SYBR GREEN I或者DNAGreen。
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