[发明专利]一种菊粉染料标记物的制备及其应用

摘要

一种菊粉染料标记物的制备及其应用，属于生物技术领域。本发明应用活性染料上的反应基团可与碳水化合物分子中的羟基或氨基共价偶合形成复合物的原理，制备菊粉染料标记物。该标记物能作为微生物可利用的唯一碳源与琼脂及无机盐按比例配制成选择培养基，经接种、培养后，根据培养基中有色菊粉被菊粉酶水解后颜色褪去出现透明水解圈的原理筛选菊粉酶产生菌，根据水解圈的大小初步判断菌株的产酶能力。本发明建立起一种简便、快捷、直观、灵敏的筛选内切菊粉酶产生菌的方法。

主权项

1、一种菊粉染料标记物的制备方法，其特征是以活性染料与菊粉共价偶合制备菊粉染料标记物；(1)将活性染料与菊粉分别溶解成溶液；(2)将上述两种溶液混合，使染料浓度为：1g/L～5g/L和菊粉浓度为：40g/L～100g/L；(3)将混合溶液置于40℃～60℃下搅拌0.5h～1h；；(4)在(3)过程中，分3次加入Na2SO4，使其浓度为：10g/L～50g/L；(5)再加入Na2CO3或其它碱性无机盐，使溶液pH值为8～10；并继续在40℃～60℃下搅拌0.5h～1h；(6)溶液冷却，加入溶液体积计2～3倍的95％的乙醇进行沉淀，5000g、4℃～6℃离心15min～30min，取沉淀物；(7)用沉淀物重20～50倍的去离子水洗涤沉淀，离心条件同上述；(8)重复(7)步骤洗涤至上清液无色；(9)40℃～60℃下沉淀物干燥48h～72h，得菊粉染料标记物。