[发明专利]一种从仙草全草中提取分离槲皮素的方法

摘要

本发明公开了一种从仙草全草中提取分离槲皮素的方法，该方法如下：①取仙草全草若干，加约20倍量水，煮沸提取，在搅拌下缓慢加入石灰水至pH为8～9，然后加3％的硼酸，在此pH条件下煮20～30分钟；②趁热过滤，残渣反复减压过滤3次，合并滤液，在60～70摄氏度条件下，用浓盐酸将合并液调至pH为5，酸水液放置24小时，抽滤；③用水将沉淀物洗至中性，60度干燥得芦丁粗品，用沸水重结晶，70～80摄氏度干燥后的芦丁纯品；④精制芦丁以1∶80加2％H₂SO₄，再火加热2h，冷却抽滤；⑤残杂水洗至中性，然后95％乙醇重结晶、葡聚糖凝胶柱色谱分离(SphadexLH20)，用甲醇做洗脱剂；⑥因芦丁不能被洗脱，从而得到槲皮素黄绿色纯品。本发明具有简单、低成本、高产率、适合工业生产的优点。

主权项

1.一种从仙草全草中提取分离槲皮素的方法，其特征在于：该方法如下：1)提取①取仙草全草若干，加约20倍量水，煮沸提取，在搅拌下缓慢加入石灰水至pH为8～9，然后加3％的硼酸，在此pH条件下煮20～30分钟；②趁热过滤，残渣反复减压过滤3次，合并滤液，在60～70摄氏度条件下，用浓盐酸将合并液调至pH为5，酸水液放置24小时，抽滤；③用水将沉淀物洗至中性，60度干燥得芦丁粗品，用沸水重结晶，70～80摄氏度干燥后得芦丁纯品；④精制芦丁以1∶80加2％H2SO4，再火加热2h，冷却抽滤；⑤残杂水洗至中性，然后95％乙醇重结晶、葡聚糖凝胶柱色谱分离(SphadexLH20)，用甲醇做洗脱剂；⑥因芦丁不能被洗脱，从而得到槲皮素黄绿色纯品；2)鉴别①采用薄层色谱法鉴定黄酮醇化合物中的槲皮素，硅胶G板，用甲苯-醋酸乙酯-甲酸(5∶4∶1)展开；3％三氯化铝乙醇液检验，紫外灯(365nm)观察；经展开、显色，显示槲皮素的斑点，Rf值＝0.58，精制槲皮素与标准品在相应的位置分别显黄色斑点；②采用高效液相色谱仪法鉴别测定黄酮醇化合物中槲皮素的含量，色谱柱：Ultimate XB-C18(5um，4.6mm×250mm)，流动相：乙腈-0.4％磷酸(45∶55)，流速：1.0ml·min-1，检测波长：360nm，柱温：25℃；结果提取物结晶在11.58分钟出现与标准槲皮素相似的色谱峰，证明所得晶体为槲皮素；经制定标准品曲线，测得提取物结晶的槲皮素含量为96.8％。