[发明专利]时间分辨荧光免疫分析中检测洗涤残留干扰的一种方法有效

专利信息
申请号: 200810022619.7 申请日: 2008-07-16
公开(公告)号: CN101324574A 公开(公告)日: 2008-12-17
发明(设计)人: 黄飚;王柯;马智鸿;周彬;张艺;朱岚;张珏 申请(专利权)人: 江苏省原子医学研究所
主分类号: G01N33/53 分类号: G01N33/53;G01N21/64
代理公司: 无锡市大为专利商标事务所 代理人: 时旭丹;刘品超
地址: 214063*** 国省代码: 江苏;32
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摘要: 时间分辨荧光免疫分析中检测洗涤残留干扰的一种方法,属于时间分辨荧光免疫分析技术领域。本发明方法采用如下工作步骤:1.在铕离子标记的TRFIA试剂中的标记物中添加一定量的钐离子;2.在微孔板上进行的TRFIA分析过程中通过洗涤去除未结合的铕标记物,同时也清洗钐离子;3.洗涤结束后加增强液,5分钟后检测,用可进行双波长测量的时间分辨荧光仪(DELFIA1235、DELFIA1420等型号仪器)分别测定每一孔的铕离子和钐离子的荧光强度cps,计算钐离子的残留量,如果大于设定的残留比例,则判定有洗涤残留的干扰。本方法可有效的发现TRFIA中由于洗涤残留造成的干扰,避免一些由于操作失误造成的假阳性或假阴性。
搜索关键词: 时间 分辨 荧光 免疫 分析 检测 洗涤 残留 干扰 一种 方法
【主权项】:
1、一种在常用的铕离子标记的时间分辨荧光免疫分析法TRFIA中检测洗涤残留的方法,其特征在于,它采用如下工作步骤:(1)在铕离子标记的TRFIA试剂中的标记物中添加2-6万cps/μL的钐离子,添加无生物活性的钐离子仅用于示踪洗涤残留的量;当用反应缓冲液稀释铕离子标记物时,同时稀释钐离子,钐离子的最终荧光强度计数控制在100000-200000cps/孔;(2)在微孔板上进行的TRFIA分析过程中当含有钐离子的铕标试剂与微孔板上的物质反应完毕之后,用洗液洗板6次,通过洗涤去除未结合的铕标记物,同时也洗涤去除钐离子;(3)洗涤结束后加增强液,5分钟后检测,用进行双波长测量的时间分辨荧光仪分别测定每一孔的铕离子和钐离子的荧光强度cps,计算钐离子的残留量,判断残留中铕离子是否超标;计算钐离子的残留比例:实测值/理论值×100%,如果大于0.1%,则判定有洗涤残留的干扰。
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