[发明专利]一种重组美洲大蠊过敏原蛋白的表达方法无效
| 申请号: | 200810008459.0 | 申请日: | 2006-07-21 |
| 公开(公告)号: | CN101220361A | 公开(公告)日: | 2008-07-16 |
| 发明(设计)人: | 张忠芳;何韶衡 | 申请(专利权)人: | 汕头大学医学院 |
| 主分类号: | C12N15/12 | 分类号: | C12N15/12;C12N15/70;C07K14/435;A61K38/17;A61P37/08 |
| 代理公司: | 广州粤高专利代理有限公司 | 代理人: | 陈卫 |
| 地址: | 515031*** | 国省代码: | 广东;44 |
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| 摘要: | 本发明涉及生物技术领域,公开了一种重组美洲大蠊过敏原蛋白的表达方法。本发明的目的是针对蟑螂过敏原浸提液进行免疫耐受治疗的不足,从常见的蟑螂种属美洲大蠊组织中提取总RNA,扩增出美洲大蠊主要过敏原基因Per a 1.0101、Per a 1.0102、Per a 1.0104、Per a 7.01的编码基因,通过基因工程手段,在大肠杆菌中低温诱导表达重组蟑螂过敏原蛋白,可用于蟑螂引起的过敏反应疾病的诊断和治疗,避免了天然提取物的非单一性及标准化难的障碍。 | ||
| 搜索关键词: | 一种 重组 美洲 过敏原 蛋白 表达 方法 | ||
【主权项】:
1.一种重组美洲大蠊过敏原蛋白Per a 1.0104的表达方法,其特征在于包括如下步骤:(1)从美洲大蠊组织中提取总RNA;(2)合成引物:pET-Per a 1.0104-P1 CATATGGTTGGTGTCGATGGTCTCATAGACpET-Per a 1.0104-P2 AAGCTTTCAGGGCAGGCCGAACCAG(3)以总RNA为模板,通过RT-PCR获得美洲大蠊过敏原蛋白编码基因片段;(4)将编码基因克隆入原核表达载体中,转化宿主菌,培养所得重组工程菌,然后诱导其表达目的蛋白;(5)采用亲和层析方法对目的蛋白进行纯化,从而获得重组美洲大蠊过敏原蛋白Per a 1.0104。
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