[发明专利]乙酰胆碱酯酶电极的制备方法

摘要

本发明公开了乙酰胆碱酯酶电极的制备方法，包括下列步骤：a.原料溶液的配制；b.用碳纳米管对玻碳电极的表面进行修饰；c.直接固定乙酰胆碱酯酶。本发明利用层层静电自组装技术将带有负电荷的AChE直接固定于到经过MWNTs修饰的玻碳电极表面，从而解决酶片法等利用载体间接固定酶带来的传质影响。本发明形成的酶传感器在有机磷及氨基甲酸酯类农药的检测中，具有灵敏度高、稳定性好等优点。

主权项

1.乙酰胆碱酯酶电极的制备方法，包括下列步骤：a.原料溶液的配制配制质量浓度为1％的聚二烯丙基二甲基氯化铵溶液，然后加入氯化钠至氯化钠的浓度达到0.8mol/L以调节聚二烯丙基二甲基氯化铵溶液的离子强度；以pH值为9.18的四硼酸钠溶液作为分散剂，配制1mg/mL的碳纳米管水分散液；以pH值为7.40的磷酸盐缓冲液为溶剂，配制100U/mL的乙酰胆碱酯酶溶液；b.用碳纳米管对玻碳电极的表面进行修饰将玻碳电极与铂电极组成的两电极体系放入步骤a制备的碳纳米管水分散液中，在两电极上施加1.70V的工作电压，使带负电的碳纳米管吸附到玻碳电极表面，2小时后取出，用去离子水冲洗，然后浸入带正电荷的步骤a制备的聚二烯丙基二甲基氯化铵溶液中，15min后取出，用去离子水小心冲洗掉残液后，再浸入带负电的碳纳米管水分散液中，15min后取出，用去离子水小心冲洗掉残液；如此反复5遍，可在电极表面形成5层碳纳米管修饰层；c.直接固定乙酰胆碱酯酶将步骤b制备的碳纳米管修饰电极浸入带正电荷的聚二烯丙基二甲基氯化铵溶液中，15min后取出，用去离子水小心冲洗掉残液后，然后浸入带负电的乙酰胆碱酯酶溶液中，15min后取出，用去离子水小心冲洗掉残液。如此反复4遍后，将电极浸入带正电荷的聚二烯丙基二甲基氯化铵溶液中，15min后取出，得到所述乙酰胆碱酯酶电极。