[发明专利]河豚鱼皮活性胶原蛋白及其肽的制备方法

摘要

河豚鱼皮的活性胶原蛋白及其肽的制备方法，是将河豚鱼皮剪成小块冷冻干燥粉碎，放入氯化钠溶液中搅拌12h，然后离心，弃上清液除去非胶原蛋白，将沉淀放入醋酸溶液中，在0～10℃下，加入胃蛋白酶，酶解，离心，上清液通过的超滤膜，上面部分冷冻干燥得胶原蛋白。将制备活性胶原蛋白后离心所剩下的沉淀洗至pH2.0～7.0，向沉淀中加入木瓜蛋白酶酶解，灭酶后离心上清液分别通过超滤膜，得到不同分子量范围的河豚鱼皮胶原蛋白肽，经冷冻干燥后得到淡黄色或白色粉状的河豚鱼皮胶原蛋白活性肽。所制得的胶原蛋白可用于医药、化工、食品等领域，河豚鱼皮胶原蛋白活性肽有较好的抗氧化性，发挥其清除自由基，降低衰老程度的作用。

主权项

1.一种胶原蛋白、及其肽的制备方法，其特征在于河豚鱼皮的活性胶原蛋白及其肽的制备方法，工艺操作步骤为：一.活性胶原蛋白的制取：(1)原料处理：将河豚鱼皮剪成小块冷冻干燥，然后用粉碎机粉碎；(2)非胶原蛋白的去除：将冷冻干燥粉碎后的鱼皮放入5-100倍体积0.5～15％的氯化钠溶液中，在0～4℃下搅拌12h，然后在10000r/min、0～4℃下离心10～30min，弃上清液，以除去非胶原蛋白，沉淀用于提取活性胶原蛋白；(3)活性胶原蛋白的提取：将除去非胶原蛋白的鱼皮放入5～100倍体积的0.05～1％醋酸溶液中，在0～10℃下，按1000～10000U/g底物的比例加入胃蛋白酶，酶解8～96h，在5000r/min、0～5℃下离心10～30min，将上清液通过5000～100000Da的超滤膜，收集超滤的上面部分，在-20～-80℃下冷冻干燥，得到的河豚鱼皮胶原蛋白；色泽洁白，无酸味，略有轻微的腥味，纯度可达80％以上；二.胶原蛋白肽的制备：(1).原料处理：将(一)中制备活性胶原蛋白离心后所得到的沉淀用去离子水洗至pH2.0～7.0，4000r/min离心10min，沉淀用于胶原蛋白肽的制备；(2).胶原蛋白肽的制取：在20～85℃、pH2.0～10.0下，按1000～12000U/g底物的比例向沉淀中加入木瓜蛋白酶，酶解0.5～10h，后80～120℃下灭酶2～5min，在4000r/min下离心10～20min，上清液分别通过10000Da、5000Da、3000Da、1000Da的超滤膜，得到10000以上、5000～10000、3000～5000、1000～3000、1000以下不同分子量范围的河豚鱼皮胶原蛋白肽，经喷雾干燥或冷冻干燥后得到淡黄色或白色粉状、复溶性好、略带腥味的河豚鱼皮胶原蛋白活性肽。