[发明专利]禽流感和马立克氏病二联活疫苗rMDV-HA病毒株及构建方法有效

专利信息
申请号: 200710133953.5 申请日: 2007-10-25
公开(公告)号: CN101575616A 公开(公告)日: 2009-11-11
发明(设计)人: 吴艳涛;郦晓琼;张小荣;徐晓静 申请(专利权)人: 扬州大学
主分类号: C12N15/869 分类号: C12N15/869;C12N15/44;A61K48/00
代理公司: 南京中新达专利代理有限公司 代理人: 孙 鸥
地址: 225009*** 国省代码: 江苏;32
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摘要: 发明涉及家禽用禽流感和马立克氏病二联活疫苗rMDV-HA病毒株及构建方法。本发明采用反转录-聚合酶链反应或聚合酶链反应扩增H5亚型禽流感病毒SY株血凝素基因、网状内皮增生症病毒LTR、筛选标志基因lac/smGFP和马立克氏病毒Rispens CVI 988疫苗株基因组外源基因并将其克隆到质粒载体中,得到重组质粒pHA、pLTR、ploxP-lac/smGFP-loxP、pUP和pDOWN,将转移载体pMHA质粒DNA与从马立克氏病毒Rispens CVI 988疫苗株感染细胞提取的DNA共转染鸡胚成纤维细胞,同源重组将外源基因插入到马立克氏病毒RispensCVI 988疫苗株基因组,得到带筛选标志基因的重组病毒rMDV-HA/GFP;由cre酶介导的loxP位点间序列重组去除rMDV-HA/GFP的筛选标志基因lac/smGFP,纯化后得到rMDV-HA病毒株。成本低、无污染、免疫期长,可作为禽流感和马立克氏病二联活疫苗病毒株。
搜索关键词: 禽流感 马立克氏病 二联 疫苗 rmdv ha 病毒 构建 方法
【主权项】:
1.一种禽流感和马立克氏病二联活疫苗rMDV-HA病毒株,其特征是在马立克氏病毒Rispens CVI 988疫苗株的基因组内插入了以网状内皮增生症病毒LTR为启动子的H5亚型禽流感病毒SY株的血凝素基因,是采用重组DNA技术人为构建的表达禽流感病毒血凝素的重组马立克氏病毒疫苗株。
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