[发明专利]诊断人乳头瘤病毒感染的荧光PCR方法

摘要

本发明涉及一种用于诊断低危型人乳头瘤病毒(HPV)感染的荧光PCR(聚合酶链式反应)检测方法，属于体外核酸诊断领域。本发明包括一个以荧光PCR技术为基础的多重聚合酶链式反应(PCR)体系，包含针对多种HPV型的正、反向引物和荧光探针，在适合的PCR条件下可在一个反应管中同时检测最多包括HPV6、11、40、42、43、44等6种HPV型的DNA。本发明可以简便快速地在临床样品中诊断HPV感染，特异性高，对尖锐湿疣早期防治、阻断传染源、减少HPV感染均有很大的临床价值。

主权项

1. 一种诊断人乳头瘤病毒(HPV)感染的荧光PCR方法，包括以下部分：(1)与多达6种HPV DNA互补的寡核苷酸序列用于PCR扩增临床样品中获得DNA的引物；在这里，每一个型别的引物序列包含：(a)一个能与一种HPV型基因对应的靶序列上游第一个位点杂交的正向引物；(b)一个能与一种HPV型基因对应的靶序列下游的第二个位点杂交的反向引物；(c)正向引物和反向引物不限于本说明书序列表列明的序列。(2)用于检测HPV的荧光标记一个或多个寡核苷酸序列探针，该探针能与位于靶序列中上述第一和第二个位点杂交之间的HPV序列杂交。探针序列可以是SEQ ID No.1-6的序列或其互补序列，还可包括由所列序列或其互补序列衍生出来的、差别不大于8个碱基的寡核苷酸序列。(3)对取得的样品进行PCR扩增，其特征在于包括一对或多对引物及探针，以HPV DNA作为模板，一个反应体系中扩增一个或多个HPV DNA目标靶序列片段。通过检测PCR反应体系中一个或多个不同荧光信号的变化，确定样品中是否感染HPV，以及HPV的含量。