[发明专利]核糖核苷酸还原酶M1基因检测试剂盒及应用

摘要

一种核糖核苷酸还原酶M1基因检测试剂盒，由盒体1、衬垫2、染料法PCR反应液3、Taq酶4、标准品5、阴性对照6、阳性对照7组成，衬垫2上设有容器孔，分别放置染料法PCR反应液3、Taq酶4、标准品5、阴性对照6、阳性对照7。本发明通过优化PCR的引物、SYBR Green I荧光染料和PCR的条件，避免了SYBR Green I荧光染料的缺陷，非特异性的扩增，本试剂盒不仅保持了PCR的高灵敏性，而且使得被检测基因的特异性大大提高。本发明设计合理，与现有探针法相比较，不需要设计荧光探针，使用方便而且成本低，可在检测肿瘤组织中核糖核苷酸还原酶M1基因表达水平中的应用。

主权项

1.一种核糖核苷酸还原酶M1基因检测试剂盒，由盒体(1)、衬垫(2)，染料法PCR反应液(3)、Taq酶(4)、标准品(5)、阴性对照(6)、阳性对照(7)组成，衬垫(2)上设有容器孔，分别放置染料法PCR反应液(3)、Taq酶(4)、标准品(5)、阴性对照(6)、阳性对照(7)，PCR反应液的成份包含：PCR缓冲液、SYBR Green I染料、MgCl2、dNTPs、检测用引物，其中核糖核苷酸还原酶M1引物序列为：RRM1-F ACCTGGAGCCTTGGCATTTAGACRRM1-R TACAACTTTGCGGACACGACCTT3-磷酸甘油醛脱氢酶引物序列为：GAPDH-F GAAGGTGAAGGTCGGAGTCGAPDH-R GAAGATGGTGATGGGATTTC核糖核苷酸还原酶M1标准品序列为：acc tggagccttg gcatttagac atctttgaat tccttgattt aaagaagaac acaggaaagg aagagcagcgtgccagagat cttttctttg ctctttggat tccggatctc ttcatgaaac gagtggagac taatcaggactggtctttga tgtgtccaaa tgagtgtcct ggtctggatg aggtttgggg agaggaattt gagaaactatatgcaagtta tgagaaacaa ggtcgtgtcc gcaaagttgt a3-磷酸甘油醛脱氢酶标准品序列为：gaa ggtgaaggtc ggagtcaacg gatttggtcg tattgggcgc ctggtcacca gggctgcttt taactctggtaaagtggata ttgttgccat caatgacccc ttcattgacc tcaactacat ggtttacatg ttccaatatgattccaccca tggcaaattc catggcaccg tcaaggctga gaacgggaag cttgtcatca atggaaatcccatcaccatc ttc。