[发明专利]转基因油菜Topas 19/2事件外源插入载体旁侧序列及其应用无效
| 申请号: | 200710051357.2 | 申请日: | 2007-01-24 |
| 公开(公告)号: | CN101020907A | 公开(公告)日: | 2007-08-22 |
| 发明(设计)人: | 卢长明;吴刚;武玉花;肖玲 | 申请(专利权)人: | 中国农业科学院油料作物研究所 |
| 主分类号: | C12N15/82 | 分类号: | C12N15/82;C12N15/29;C12N15/65;C12Q1/68 |
| 代理公司: | 武汉宇晨专利事务所 | 代理人: | 黄瑞棠 |
| 地址: | 430062湖*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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| 摘要: | 本发明公开了一种转基因油菜Topas 19/2事件外源插入载体旁侧序列及其应用,涉及生物工程技术领域中转基因油菜的检测。本发明以转基因油菜品种Topas 19/2为材料,利用Invitrogen公司GenomeWalker试剂盒构建基因组文库,并利用引物:TOPLB-1:5’TCGCCCAATAGCAGCCAGTCCCTTCC 3’和TOPLB-2:5’AGTCCCTTCCCGCTTCAGTGACAACG 3’与试剂盒提供的接头引物进行PCR扩增,获得Topas 19/2事件外源插入载体旁侧序列,序列为SEQ NO.1。其中第1-550位碱基与插入载体序列相同,第551-823位碱基与插入载体无同源性,为油菜基因组序列。根据插入载体序列和油菜基因组序列的接合序列,设计了引物TOPLG:5’CGGCCTTAATCCCACCCCAG 3’和TOPLV:5’AGTTCCAAACGTAAAACGGCTT 3’以及TaqMan探针TOPLP:5’FAM-TCCCGGTCATATATCAGCGCCGGTC-TAMRA 3’,建立了转基因油菜外源基因整合事件Topas 19/2的事件特异性定性、定量检测方法。本发明可以进一步用于建立转基因油菜Topas 19/2的其他事件特异性PCR检测方法研究。 | ||
| 搜索关键词: | 转基因 油菜 topas 19 事件 插入 载体 旁侧 序列 及其 应用 | ||
【主权项】:
1、一种转基因油菜Topas 19/2事件外源插入载体旁侧序列,其特征是:(1)第1至550个碱基来源于外源插入载体序列,SEQ NO.1;(2)第551至823个碱基来源于油菜基因组序列,SEQ NO.1;(3)由来源于外源插入载体的第1至550个碱基和来源于油菜基因组序列的第551至823个碱基共同组成的DNA序列,转基因油菜Topas 19/2事件外源插入载体旁侧序列;
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