[发明专利]一种菊花种质资源离体保存的方法无效

专利信息
申请号: 200710019345.1 申请日: 2007-01-17
公开(公告)号: CN101002541A 公开(公告)日: 2007-07-25
发明(设计)人: 陈发棣;王艳芳;房伟民;管志勇;刘兆磊;滕年军;陈素梅;赵宏波;许高娟;缪恒彬;姜贝贝;丁玲 申请(专利权)人: 南京农业大学
主分类号: A01H4/00 分类号: A01H4/00;C12N5/04;A01N3/02
代理公司: 南京经纬专利商标代理有限公司 代理人: 楼高潮
地址: 210095江苏省南京*** 国省代码: 江苏;32
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摘要: 发明涉及一种菊花种质资源离体保存的方法,专用于菊花种质资源离体保存。取菊花脚芽为外植体,以腋芽进行继代增殖。在分别附加了20~40mg·L-1脱落酸(ABA)的MS+0.3mg·L-16-BA+0.1mg·L-1NAA培养基中进行保存,10个月后存活率均为100%,比正常培养基上生长的试管苗延长存活6个月。保存材料恢复生长正常,其后代经过氧化物酶(POD)及酯酶(EST)同工酶、ISSR分子标记检测未发生遗传变异。本发明首次利用在培养基中添加脱落酸保存菊花试管苗并对其后代进行遗传稳定性鉴定,不但保存10个月后植株生长正常,而且保存材料的后代未发生遗传性变异。
搜索关键词: 一种 菊花 种质 资源 保存 方法
【主权项】:
1、一种菊花种质资源离体保存的方法,包括:以菊花脚芽为外植体,用75%乙醇表面消毒30s,无菌水冲洗2次,再用0.1%升汞灭菌8min,无菌水冲洗5次后,将其切割成去叶带1个节的茎段接入MS培养基中;20d后将萌发的腋芽转接到MS+0.3mg.L-1 6-BA+0.1mg.L-1 NAA的增殖培养基上进行扩繁;30d后将增殖的不定芽切割成带2个节的茎段转入附加20~40mg.L-1脱落酸的增殖培养基中进行保存;以上培养基中含蔗糖3%、琼脂0.7%,pH为6.0,培养条件23±2℃、光照强度2000~3000lux、光照时间12h/d。
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