[发明专利]一种离体诱导冬枣花药愈伤组织的方法无效
申请号: | 200610139091.2 | 申请日: | 2006-10-09 |
公开(公告)号: | CN1934932A | 公开(公告)日: | 2007-03-28 |
发明(设计)人: | 刘孟军;王娜;赵锦;秦子禹 | 申请(专利权)人: | 河北农业大学 |
主分类号: | A01H4/00 | 分类号: | A01H4/00;C12N5/04;A01G7/00 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 071001河北省保定*** | 国省代码: | 河北;13 |
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摘要: | 一种离体诱导冬枣花药愈伤组织的方法,即通过冬枣花药的组织培养获得其愈伤组织,愈伤组织诱导率达86.23%,包括外植体采集、消毒、初始诱导、增殖培养。在5~6月选取田间直径为0.3~0.6cm、花萼尚未张开的冬枣未成熟花蕾,4℃冰箱预处理1~3d。流水冲洗1~2h,超净工作台上将花蕾放入70%乙醇30s,再转入0.1%HgCl2溶液中8min,无菌水冲洗3~4次后剥取花药,启动培养时将无菌花药接种在MS+麦芽糖15~20g/L+TDZ0.5-1.0mg/L+NAA0-0.5mg/L的培养基上进行暗培养三周,然后转至弱光下(800~1000Lux)培养。花药逐渐产生黄绿色的、松散颗粒状的愈伤组织,且随培养时间的延长逐渐增多。增殖培养时将获得的初始愈伤组织转接到MS+麦芽糖15~20g/L+TDZ0.1-0.5mg/L+NAA0-0.5mg/L的培养基中进行增殖培养,愈伤组织可快速增殖。以上培养基基本培养基为MS培养基,麦芽糖15~20g/L,琼脂3.5g/L,培养基灭菌前pH为5.8~6.0。光照周期为15小时光照、9小时黑暗。光照强度800~1000Lux。温度控制在27±1℃。该方法可在70d左右获得大量冬枣花药愈伤组织。 | ||
搜索关键词: | 一种 诱导 花药 组织 方法 | ||
【主权项】:
1.一种离体诱导冬枣花药愈伤组织的方法,其特征在于通过对冬枣花药进行组织培养,获得其愈伤组织,愈伤组织诱导率达86.23%。
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