[发明专利]一种磷霉素产生菌株的筛选方法

摘要

本发明涉及生物医药领域，具体为一种磷霉素产生菌株的筛选方法，将磷霉素生物转化菌株发酵液冷冻浓缩的方法应用于筛选过程中，冷冻浓缩是将预冷却到0～10℃的菌株发酵液放置到－30℃～－10℃的乙醇－冰冷却剂中，于真空度为10～20Pa、冷冻温度为－30℃～－10℃下，冷冻15min～2小时，至干燥形成浓缩液。本发明以右旋磷霉素为底物培养待鉴定菌株，以大肠杆菌作为生物鉴定的指示菌，在把发酵液进行冷冻浓缩后，利用牛津杯在生物鉴定盘(或平板)上鉴定发酵液可否产生抑菌圈，从而达到筛选磷霉素生物转化菌株的目的。本发明具有不使抗生素失活、操作简单、成本低等优点，对于增加单位体积发酵液中磷霉素的浓度和提高磷霉素转化菌株的鉴定灵敏度和效率非常适用。

主权项

1、一种磷霉素产生菌株的筛选方法，其特征是：首先，对摇床培养后的菌株发酵液进行冷冻浓缩；然后，利用牛津杯在生物鉴定盘或平板上鉴定发酵液对敏感菌的抗性，以初步确定是否为抗生素产生菌；所述冷冻浓缩的步骤如下：(1)冷却剂的制备：冷却剂采用体积浓度4～10％的乙醇，将乙醇在-30℃～-10℃的冰箱里预冷30min～1小时，得到已结冰的乙醇-冰冷却剂；(2)发酵液的预处理：将发酵液放到冰箱冷冻室中，冷却到0～10℃；(3)冷冻浓缩：将已预冷却到0～10℃的发酵液放置到乙醇-冰冷却剂中，于真空度为10～20Pa、冷冻温度为-30℃～-10℃下，冷冻15min～2小时，至干燥形成浓缩液为止。