[发明专利]修饰纤维素酶催化提取薯蓣皂素的方法

摘要

本发明公开了一种利用修饰纤维素酶提取薯蓣皂素的方法。属于由薯蓣植物提取薯蓣皂素的技术。该方法主要包括以下步骤：将三聚氯氰溶解于苯中，重结晶后，按照一定的比例与在苯中经过分子筛和无水碳酸钠处理后的聚乙二醇反应，制得活化的聚乙二醇；活化聚乙二醇与天然纤维素酶以一定比例在柠檬酸－柠檬酸钠缓冲溶液中反应，最后利用超滤膜分离制得的修饰纤维素酶；将修饰纤维素酶加入原料的水浸泡液之中，经催化，水解，中和，提取，结晶得到薯蓣皂素产品。本发明的优点在于修饰纤维素酶抵制环境和温度的能力增强，在较长时间内具有较高的催化活性，催化效果明显，此修饰酶特别适用于富含纤维素天然产物中有效成分的提取，具有广泛的通用性。

主权项

1.一种修饰纤维素酶催化提取薯蓣皂素的方法，其特征在于包括以下过程：1).三聚氯氰的纯化，配制质量浓度为6％～15％的三聚氯氰苯溶液，重结晶两次，得到纯化的三聚氯氰；2).聚乙二醇的活化，按聚乙二醇4000与4A分子筛和无水碳酸钠的质量比为1∶2～6∶4～10将聚乙二醇4000、4A分子筛和无水碳酸钠加入溶剂苯中，常温搅拌30～60分钟后，过滤，去除4A分子筛和碳酸钠得到滤液，然后按照聚乙二醇4000与纯化的三聚氯氰的摩尔比为2～2.5∶1将步骤1)制得的纯化的三聚氯氰加入到滤液中，常温条件下反应20～50小时，溶液再经浓缩，过滤，低温干燥，得到活化的聚乙二醇；3).纤维素酶的修饰，将纤维素酶和步骤2)制得的活化聚乙二醇按照质量比为1∶2～6加入到pH为5.0～7.0柠檬酸-柠檬酸钠缓冲溶液中，控制温度为0℃～8℃，反应1～5小时，采用截留分子量为5000～10000的超滤膜分离出纤维素酶，低温冷冻干燥得到修饰纤维素酶；4).薯蓣皂素的转化提取，把粉碎的盾叶薯蓣或穿龙薯蓣原料按照质量比为1∶3加入水中浸泡30～60分钟，再按照与盾叶薯蓣或穿龙薯蓣质量比2.0‰的比例将步骤3)制得的修饰纤维素酶加入浸泡液中，控制温度50℃～60℃下催化作用反应4～7小时，然后用硫酸或盐酸调节体系的酸浓度为2mol/L～5mol/L，温度为98～108℃下水解，水解液采用5％的Na2CO3水溶液洗涤至中性过滤，将滤饼置于60～80℃烘箱中干燥，干燥后的固体物利用萃取剂120#汽油于索式提取器内萃取，萃取液经浓缩，过滤，低温干燥后得薯蓣皂素产品。