[发明专利]一种骨髓神经组织定向干细胞的培养方法无效
申请号: | 200610119437.2 | 申请日: | 2006-12-12 |
公开(公告)号: | CN1974764A | 公开(公告)日: | 2007-06-06 |
发明(设计)人: | 张志英;张传森;任丛莉 | 申请(专利权)人: | 中国人民解放军第二军医大学 |
主分类号: | C12N5/06 | 分类号: | C12N5/06;C12N5/08 |
代理公司: | 上海德昭知识产权代理有限公司 | 代理人: | 程宗德;石昭 |
地址: | 200433*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | 本发明涉及生物组织工程技术领域,是一种制备神经修复移植用种子细胞——骨髓神经组织定向干细胞的培养方法。本发明只需少量骨髓,分离到骨髓单核细胞后经增殖培养,再用含2%B27、1%N2、20ng/ml bFGF、20ng/ml EGF的DMEM/F12无血清培养液进行筛选、纯化、培养就可制得足够量的骨髓神经组织定向干细胞。本发明操作简便、成本低廉,得到的骨髓神经组织定向干细胞稳定、安全,且可来源于自体,避免了免疫排斥和伦理学等问题。本发明为中枢神经系统疾患的细胞移植治疗及周围神经的修复提供了一种移植用种子细胞的来源途径。 | ||
搜索关键词: | 一种 骨髓 神经 组织 定向 干细胞 培养 方法 | ||
【主权项】:
1、一种骨髓神经组织定向干细胞的培养方法,包括制备骨髓单核细胞,骨髓单核细胞的贴壁生长、增殖,以及骨髓神经组织定向干细胞的筛选纯化及增殖;其特征在于骨髓单核细胞的贴壁生长、增殖采用的是含15%~20%胎牛血清的DMEM培养液,骨髓神经组织定向干细胞的筛选纯化、增殖采用的是含2%B27、1%N2、20ng/mlbFGF、20ng/mlEGF的DMEM/F12无血清培养液;骨髓神经组织定向干细胞在含2%B27、1%N2、20ng/mlbFGF、20ng/mlEGF的DMEM/F12无血清培养液中悬浮生长,并形成细胞球,选取细胞球进行增殖培养,即得所需的骨髓神经组织定向干细胞。
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