[发明专利]同时测定鱼肉中复方磺胺甲噁唑及代谢物的液相色谱法

摘要

一种同时测定鱼肉中复方磺胺甲噁唑及代谢物的液相色谱法。以盐酸、3∶1比例的二氯甲烷/丙酮混合液作为提取剂，可将残留在鱼肉组织中的磺胺甲噁唑、乙酰化磺胺甲噁唑和甲氧苄啶充分提取出，提取的杂质少，可省略净化的过程；加入提取液后，在4℃冰箱静置一段时间，能够使蛋白质变性充分，从而减少提取时因蛋白黏附在高速均质器上所造成的损失，提高了回收率；将提取的有机溶剂用氮气吹干、过滤后即可进高效液相色谱仪测定。本发明方法操作简便、快速、检测成本低、灵敏度高，可用在科研单位和进出口商品检测部门进行鱼肉中复方磺胺甲噁唑及代谢物含量的测定。

主权项

1、一种同时测定鱼肉中复方磺胺甲噁唑及代谢物的液相色谱法，其特征在于它的技术方法，包括样品制备、样品前处理、标准溶液的配制、流动相配制及测定所用色谱条件；A、样品制备：采集鱼的肌肉组织样品，用剪刀初步剪碎，用高速均质器均质，冷冻保存；B、样品前处理：称取解冻鱼肉组织，加入盐酸，静置，加入无水硫酸钠后，加入二氯甲烷/丙酮混合液，4℃条件下静置一段时间后，用高速均质器均质，用二氯甲烷/丙酮混合液清洗均质器的刀头，提取液经充分振荡后离心，残渣用二氯甲烷/丙酮提取液再次提取，合并2次提取液并用氮气吹干，残渣用流动相溶解，加入正己烷去脂肪，下层液用微孔滤膜过滤后进高效液相色谱仪测定；所述的样品前处理，加入盐酸的浓度为0.3mol/L；加入盐酸的比例为0.2mL/g肌肉；加入盐酸后的静置时间为1小时；加入的提取液为3∶1比例混合的二氯甲烷/丙酮混合液；4℃冰箱静置的时间为8-12小时后；C、标准溶液的配制：分别准确称取200mg磺胺甲噁唑、200mg乙酰化磺胺甲噁唑和200mg甲氧苄啶标准品一起溶于100mL流动相中，配成同时含有浓度为200μg/mL三种药物的母液，于冰箱中4℃保存，临用前再依次稀释成系列梯度的标准溶液；D、流动相配制：取乙腈、重蒸水、冰醋酸按20∶80∶0.5的比例配制流动相，超声波脱气30min后备用；E、测定所用色谱条件：色谱柱选用规格为4.6mm×250mm C18 ODS柱；柱温：25-30℃；流速：0.8-1.0mL/min；进样量10-20μL；紫外检测：波长272nm；流动相为水∶乙腈∶冰醋酸＝80∶20∶0.5。