[发明专利]一种用于快速测定蛋白质N端序列的方法和试剂盒无效
| 申请号： | 200610065078.7 | 申请日： | 2006-03-20 |
| 公开（公告）号： | CN101042376A | 公开（公告）日： | 2007-09-26 |
| 发明（设计）人： | 钱小红;周春喜;张养军 | 申请（专利权）人： | 中国人民解放军军事医学科学院放射与辐射医学研究所 |
| 主分类号： | G01N30/02 | 分类号： | G01N30/02;G01N30/06;C12Q1/68;B01D15/08 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 100850*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 为了快速地确证蛋白质，尤其是基因工程重组蛋白质的N端序列，本专利提供了一种用于快速测定蛋白质N端序列的新方法和试剂盒。该方法涉及蛋白质氨基的修饰、还原烷基化和胰酶酶切、酶切肽段的质谱分析、N端肽段的质谱识别与测序。通过对N端氨基的选择性磺化修饰，在质谱上既容易确定N端肽段，又可以很方便地进行测序，主要用于确证蛋白质，尤其是基因工程产品的N端序列。本专利还描述了便于该方法实施的试剂盒。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 用于 快速 测定 蛋白质 序列 方法 试剂盒 | ||
【主权项】：
1.一种用于快速测定蛋白质N端序列的方法，该方法包括：(1)对蛋白质的氨基进行化学修饰(2)用还原剂打开蛋白质分子中的二硫键，破坏其高级结构；用烷基化试剂封闭巯基，防止其重新形成二硫键；(3)用化学消化或酶消化法对蛋白质进行消化，产生适于质谱分析的肽段；(4)用质谱分析技术分析蛋白质末端肽段，使其裂解产生碎片离子的质谱图；其特征在于所述步骤(1)的处理方法为：(a)用磺酸衍生物对蛋白质的末端氨基进行化学修饰，使其带上酸性基团；(b)用一种或多种含游离氨基的化学试剂，对蛋白质的修饰反应进行终止。
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