[发明专利]一种贯叶金丝桃中金丝桃素提取物的提取方法

摘要

本发明涉及一种贯叶金丝桃中金丝桃素提取物的提取方法，一种贯叶金丝桃中金丝桃素提取物的提取方法，包括如下步骤：A.制备金丝桃素硅胶柱层析提取物步骤，又包括如下分步骤：A1准备样品、A2配制洗脱液、A3装柱、A4上样、A5硅胶柱洗脱、A6组分的收集；B.制备金丝桃素凝胶过滤提取物步骤，又包括如下分步骤：B1凝胶的预处理与装柱、B2上样、B3洗脱及收集，即得到提取物产品。本发明工艺简单，提取物中金丝桃素含量高，其作为光敏物质，可进行光动力治疗(Photodynamic therapy，PDT)，对人肝癌细胞系HepG2、人肺癌细胞系A549、SpcA1和人乳腺癌细胞系MDA231有明显生长抑制作用。

主权项

1、一种贯叶金丝桃中金丝桃素提取物的提取方法，其特征在于，包括如下步骤：A、制备金丝桃素硅胶柱层析提取物步骤，又包括如下分步骤：A1、准备样品，将贯叶金丝桃粗提物加入甲醇中溶解，超声波处理20～40min后过滤，再在滤液中加入一定量的柱层析硅胶，混匀后蒸干溶剂；A2、配制洗脱液，采用氯仿-甲醇梯度洗脱剂，洗脱剂极性逐渐增大，氯仿∶甲醇＝9∶1-8.5∶1.5-8∶2-7.5∶2.5(v/v)；A3、装柱，将一定量的柱层析硅胶与氯仿：甲醇＝9∶1的初始洗脱剂混匀，浸泡8～12小时，在色谱柱下端垫上一层防止漏胶的脱脂棉，缓慢将处理好的硅胶倒入色谱柱，同时不停地敲打色谱柱外侧，使硅胶装实，随着洗脱剂的流出，硅胶不断沉积下来，沉降6～10小时；A4、上样，继续沉降直至溶剂仅够覆盖硅胶表面为止，将处理好的样品缓慢加入色谱柱，随着溶剂的流出，形成一层样品层；A5、硅胶柱洗脱，采用氯仿-甲醇洗脱剂梯度洗脱，洗脱剂极性逐渐增大；A6、组分的收集，将所收集的样品经由TLC检测，合并相同组分，用旋转蒸发仪蒸干，得到金丝桃素硅胶柱层析提取物；B、制备金丝桃素凝胶过滤提取物步骤，又包括如下分步骤：B1、凝胶的预处理与装柱，将葡聚糖凝胶干粉浸泡于60～70％乙醇中6～10小时，洗去可能存在的残留物，湿态不间隙装柱；B2、上样，将金丝桃素硅胶柱层析提取物用甲醇溶解，再经超声波处理后过滤，然后缓慢沿柱壁上样，当溶液缓慢下降至柱内，缓慢加入洗脱液；B3、洗脱及收集，采用甲醇为洗脱剂进行洗脱，将洗脱后的提取物进行收集即得到提取物产品。