[发明专利]一种异性孪生不育母牛的检测方法

摘要

本发明公开了一种异性孪生不育母牛的检测方法，属于动物遗传育种技术领域。该方法包括：待检母牛和阴性对照牛(正常母牛)及阳性对照牛(正常公牛)血液样品或组织样品的采取；样品基因组DNA的提取；根据GenBank中牛1.715微卫星DNA序列设计一对内标基因引物；根据GenBank中牛Sry基因序列设计一对检测基因引物；最佳扩增体系的建立及样本检测与判定等技术步骤。本方法具备快速(5－10个小时)、简便、准确(通过扩增产物有无即可直观判断)，成本低廉(2元/每样本)等特点，能及早检测出异性孪生不育母牛犊，以便及早淘汰，减少奶牛养殖者的损失。

主权项

1、一种异性孪生不育母牛的检测方法，其特征在于包括以下步骤：1)、待检异性孪生母牛血液样品或组织样品的采取、备用；2)、阴性对照牛和阳性对照牛血样或组织样品的采取、备用；3)、样品的基因组DNA的提取；4)、根据牛1.715微卫星DNA序列设计一对内标基因引物，扩增片断长度为216bp，引物序列为：5′端引物：5′-TGGAAGCAAAGAACCCCGCT-3′3′端引物：5′-GAACTTTCAAGCAGCTGAGGC-3′；5)、根据牛Sry基因序列设计一对检测基因引物，扩增片断长度为302bp，引物序列为：5′端引物：5′-TGAACGCCTTCATTGTGTGGTC-3′3′端引物：5′-GCTAGTAGTCTCTGTGCCTCCT-3′；6)、最佳扩增体系的建立：利用正交试验，摸索建立牛1.715微卫星DNA和牛Sry基因片断的最佳扩增体系；7)根据待检测样品和对照样品的1.715微卫星DNA和Sry基因片断的扩增结果，对被检测母牛是否为异性孪生不育母牛进行判定。