[发明专利]西洋杜鹃组培快速繁殖及试管开花的方法及所用的培养基

摘要

本发明公开了一种西洋杜鹃组培快速繁殖及试管开花的方法及所用的培养基，特征是，采用嫩茎尖和茎段形成丛生芽的快速繁殖方法，在快速繁殖的基础上对其试管苗进行花芽诱导，它包括外植体的准备、无菌培养系的建立与增殖、试管苗的壮苗和生根培养和试管苗开花诱导等几个步骤。本发明具有培养周期短、分枝生长好、不受季节影响的特点。通常西鹃需3个月左右产花，本发明的试管苗只需2个月即可开花。

主权项

1、西洋杜鹃组培快速繁殖及试管开花的方法，其特征在于，采用嫩茎尖和茎段形成丛生芽的快速繁殖方法，在快速繁殖的基础上对其试管苗进行花芽诱导，它包括下列步骤：a、外植体的准备取1-1.5cm长的含1-3个腋芽节的新发嫩茎的茎尖和茎段，置自来水下冲1-2h，在此期间用玻璃棒轻轻搅动2-3次；在无菌条件下经70％酒精漂洗30-60s，无菌水冲一次，转入0.1％氯化汞溶液消毒6-8分钟，无菌水冲4-5次；除去茎尖和茎段上变黑的部分，放入装有滤纸的无菌培养皿中备用；b、无菌培养系的建立与增殖在超净工作台上，将茎尖和茎段斜插于外植体诱导培养基中，外植体诱导培养基为Read、MS有机成分物、蔗糖20～30g/L、玉米素1.0～2.5mg/L、萘乙酸0.05～0.1mg/L，外植体诱导培养基中含琼脂9～11g/L，pH5.0～5.4；温度25±1℃，光照12h/黑暗12h，光照强度1500～2000lx；将诱导出来的芽放入丛生芽增殖培养基中进行增殖培养，增殖阶段的培养物培养25～30天；丛生芽增殖培养基为Read、MS有机成分物、蔗糖20～30g/L、玉米素1.0～2.5mg/L、萘乙酸0.05～0.1mg/L，丛生芽增殖培养基中含琼脂9～11g/L，pH5.0～5.4；温度25±1℃，光照12h/黑暗12h，光照强度1500～2000lx；c、试管苗的壮苗和生根培养将增殖后的丛生芽割开，接种到壮苗培养基中，培养25～35天；壮苗培养基为Read、MS有机成分物、6-苄基腺嘌呤0.5～1.0mg/L、萘乙酸0.05～0.1mg/L；壮苗培养基中含蔗糖20～30g/L，琼脂9～11g/L，pH5.0～5.4；温度25±1℃，光照16h/黑暗8h，光照强度1500～2000lx；选择生长较好的苗接种在生根培养基中，作25～35天的生根培养，生根培养基为Read、MS有机成分物、萘乙酸0.5～2.0mg/L、吲哚丁酸0.5～1.0mg/L、玉米素0.1～0.2mg/L；生根培养基中含蔗糖20～30g/L，琼脂9～11g/L，pH5.0～5.4；温度25±1℃，光照16h/黑暗8h，光照强度1500～2000lx；d、试管苗开花诱导培养基将生长较好的试管苗接种到试管苗开花诱导培养基中，试管苗开花诱导培养基为1/2Read、MS有机成分物、吲哚丁酸1.0～2.0mg/L、0.2％活性炭，3个月后试管苗顶端诱导出花芽，培养10天后开花；试管苗开花诱导培养基中含蔗糖20～30g/L，琼脂9～11g/L，pH5.0～5.4；温度25±1℃，光照16h/黑暗8h，光照强度1500～3000lx。