[发明专利]一种利用废弃菌渣生产微生物杀虫剂和壳聚糖酶的方法

摘要

本发明公开了一种利用发酵工业废弃菌渣，经固态发酵同时生产微生物杀虫剂和壳聚糖酶的方法，它是以麸皮、根霉干燥菌渣为培养基的主要原料，并以根霉干燥菌渣为培养基中主要氮源和壳聚糖酶诱导剂，同时辅以木屑，接种金龟子绿僵菌的孢子悬液后，于相对湿度为60～75％、温度为25～28℃的条件下，静态培养5天，再将发酵后的培养物过筛收集分生孢子，剩余培养物加水或缓冲溶液经压滤除渣即获壳聚糖酶溶液。本发明发酵用原料易得、降低了发酵中对粮食的需求，生产成本低廉、操作简单、产酶能力稳定、有效地利用了工业废渣，具有较高的经济和实用价值。

主权项

1、一种利用废弃菌渣生产微生物杀虫剂和壳聚糖酶的方法，其特征在于包括如下工艺步骤：A、菌种保藏：将金龟子绿僵菌(Metarhizium guizhouense)菌种于4℃接种在PDA斜面培养基上，每半年转接一次，该斜面培养基的配方按g/L为：土豆汁20％，葡萄糖2％，琼脂1.5％，MgSO4·7H2O0.5％，K2HPO40.3％；B、种子培养：将上述PDA斜面培养基于115℃灭菌15分钟后接种于另一PDA斜面培养基上，并将其作为种子培养基于25℃～29℃培养7～10天，用灭菌好的0.5％的Tween-80溶液洗下孢子，即得孢子悬液；C、固态发酵：选取麸皮、根霉干燥菌渣为培养基的主要原料，其中，固态营养基质按重量计包括如下组分：麸皮10～30份、根霉干燥菌渣粉末30～60份、木屑10～30份、缓冲液50～100份、MgCl20.01～0.2份、KH2PO4 0.01～0.2份、CuSO4 0.001～0.05份、ZnSO4 0.01～0.2份；将上述固态营养基质混合均匀，并于培养基115℃灭菌15分钟后，接种孢子悬液，接种量为固态培养基总重量的5～15％，在相对湿度为60～75％、温度为25～28℃的条件下，静态培养5天；D、孢子和酶的分离：将经固态发酵后的培养物过筛收集分生孢子后，然后向剩余培养物中加入10倍重量的水或者pH值为4～8的缓冲溶液，机械搅拌1小时后，压滤除渣，所得上清液即为壳聚糖酶液。