[发明专利]液体深层发酵法生产番茄红素的方法

摘要

液体深层发酵法生产番茄红素的方法，它包括菌株培养基、物理化学诱变、高产菌株形成、种子培养、发酵培养、添加前提物及抗氧化剂、添加阻断剂、过滤、真空干燥、粉粹、丙酮萃取、硅胶柱分离、浓缩、目标产物的形成。本发明克服了现有番茄红素油树脂生产中产率低、设备要求高、不适合工业化生产等不足；具有适合于工业发酵生产、并且生产成本低、操作安全方便、产率高等优点。

主权项

1、液体深层发酵法生产番茄红素的方法，其特征在于它包括如下步骤：a)、将CCTCC编号为14059(+)、14060(-)的三孢布拉氏霉菌菌株接到活化培养基活化，活化培养基为斜面培养基；b)、将a)项培养到孢子萌发时进行紫外线诱变或亚硝基胍诱变；c)、将b)项通过筛选得到高产的优良菌株，接种于活化培养基；d)、在无菌条件下，从己培养6d的(+)(-)斜面培养基上分别挑取两环孢子接入种子培养基中；在27℃，150rpm的条件下，培养28h；e)、将d)项生长正负菌在无菌的条件下1∶10混合，再以10％的按种量接入发酵培养基，装液量45ml/250ml，pH 6.5；在28℃，250rpm的条件下，培养120h；f)、将e)项发酵培养48h时，加入前体物β-紫罗酮，异烟肼和琥珀酰亚胺，三者添加量分别为1ml/L，1g/L，5g/L；同时加入抗氧化剂2，6-二叔丁基对甲酚，添加量为1g/L；g)、培养完成后，对发酵后的菌液采用4-6层纱布过滤，得到深红色菌体；再将所得菌体真空干燥，温度45℃，0.1Mpa，真空干燥24h，称量菌体干重，将菌体粉碎成60-80目的菌粉备用；h)、用丙酮作为萃取剂进行多次萃取，料液比为1∶3，萃取温度为30-40℃，萃取时间为1.5-3h，pH为5.5-8.0，萃取过程中添加0.5％抗氧化剂2，6-二叔丁基对甲酚；分次萃取后，收集萃取液，通过柱层析法分离番茄红素与其他色素，吸附剂为100-200目层析硅胶，洗脱剂为丙酮，番茄红素油树脂与丙酮比例为1∶10，洗脱温度为室温，流速为3.5ml/min；i)、所得洗脱液加热，浓缩，即得目标产物6％番茄红素油树脂。