[发明专利]一种从脐带血中分离多能成体祖细胞的方法无效
| 申请号： | 200610013580.3 | 申请日： | 2006-04-29 |
| 公开（公告）号： | CN1920010A | 公开（公告）日： | 2007-02-28 |
| 发明（设计）人： | 邱录贵;李云涛;徐燕;孟恒星;于珍;韩俊领 | 申请（专利权）人： | 中国医学科学院血液学研究所 |
| 主分类号： | C12N5/08 | 分类号： | C12N5/08 |
| 代理公司： | 天津才智专利商标代理有限公司 | 代理人： | 王晓红 |
| 地址： | 300020*** | 国省代码： | 天津;12 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种从脐带血中分离多能成体祖细胞的方法，包括利用淋巴细胞分离液分离脐带血单个核细胞，在含有8～15％胎牛血清的培养基中培养3天，弃去未贴壁的细胞，继而更换为含2～5％胎牛血清、人碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、人表皮生长因子(EGF)、人血小板衍生的生长因子(PDGF－BB)、MCDB－201、抗坏血酸、地塞米松和ITS添加剂的培养基中继续贴壁培养，传代纯化分离。采用本发明的方法从脐带血中分离多能成体祖细胞，与其它方法相比，分离成功率高，所获细胞表型、细胞周期和诱导分化能力相同。因此，用此方法分离脐带血多能成体祖细胞可显著提高效率。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 脐带血 分离 多能 成体 细胞 方法 | ||
【主权项】：
1、一种从脐带血中分离多能成体祖细胞的方法，依次包括以下步骤：第一步：将体外脐带血用磷酸盐缓冲液等倍稀释，利用淋巴细胞分离液分离单个核细胞；第二步：将分离的脐带血单个核细胞在含有8～15％胎牛血清的培养基中培养48-72小时，弃去未贴壁的细胞；第三步：更换为含2～5％胎牛血清、人碱性成纤维细胞生长因子bFGF、人表皮生长因子EGF、人血小板衍生的生长因子PDGF-BB、MCDB-201、抗坏血酸、地塞米松和1×胰岛素-转铁蛋白-亚硒酸钠ITS添加剂的培养基中继续贴壁培养；第四步：传代纯化分离脐带血多能成体祖细胞。
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