[发明专利]抗－恒河猴D重组多克隆抗体和生产方法

摘要

本发明涉及用于生产抗－RhD重组多克隆抗体组合物(抗－RhDrpAb)的方法所述方法包括获得用抗－RhD抗体表达载体转染的细胞的集合，其中在所述集合中的每个细胞能从包含V_H和V_L的核酸片段表达文库的一个成员，所述的文库成员编码抗－RhD重组多克隆抗体组合物的一个独特成员并且其位于所述集合中的单独细胞的基因组中的相同位点。将所述细胞在适合表达所述重组多克隆抗体的条件下培养，所述抗体从细胞或培养物上清液获得。通过用用于位点特异性整合的载体文库转染细胞而将编码抗－RhD rpAb的核酸片段导入所述细胞中。本方法适于生产抗－RhD rpAb，因而可以得到优于血浆来源的预防性和治疗性免疫球蛋白产物的替代品。

主权项

1.产生细胞集合的方法，所述细胞适于作为用于表达抗-RhD重组多克隆抗体的生产型细胞系，所述的方法包括a)提供了抗-RhD抗体表达载体文库，其中所述文库的每个单独载体包括：1)单拷贝的编码抗-RhD多克隆抗体的独特成员的核酸片段和2)一个或多个重组酶识别序列；b)将所述的抗-RhD抗体表达载体文库导入宿主细胞系，其中所述宿主细胞系的各单个细胞的基因组包含重组酶识别序列，所述的识别序列在其基因组中与载体上的重组酶识别序列匹配；c)确保在所述细胞中存在一个或多个重组酶，以使步骤(a)中的编码抗-RhD抗体的核酸片段位点特异性地整合进宿主细胞系的细胞中，其中所述的重组酶是i)由导入了所述核酸序列的所述细胞表达的；ii)由步骤(a)中的载体有效编码；iii)通过第二载体表达而提供；或iv)作为蛋白质提供给所述细胞；和d)选择细胞，所述的细胞含有来自所述抗-RhD抗体表达载体文库的整合的编码抗-RhD抗体的核酸片段的拷贝。