[发明专利]菌根真菌在石斛大面积栽培中的应用

摘要

一种菌根真菌在石斛大面积栽培中的应用技术，所用的4种菌根真菌为小菇属真菌：石斛小菇(Mycenadendrobii)，紫萁小菇(Mycen osmundicola)，兰小菇(Mycenaorchidicola)，开唇兰小菇(Mycena anoectochila)；先分别培养菌根真菌和石斛苗，当石斛苗移栽到大田时加入菌根真菌共生栽培。采用该项新技术，可以大大缩短石斛的生长周期，提高石斛药材的产量和有效成分的含量。该项技术栽培方法简单、易于大面积推广、投资少、不施任何化学肥料、激素和农药，生产出的石斛药材为绿色产品。

主权项

1.一种应用菌根真菌大面积栽培石斛的方法，包括步骤：(1)菌根真菌的发酵培养将4种菌根真菌MD-1，MO-1，MO-2，MA-1自低温保藏的斜面试管菌种活化后，分别转接于含PDA培养基的平皿中，于22-28℃恒温培养10-20天，分别在菌落边缘打孔成菌片，并以小碎块接入液体培养基中进行发酵培养；由平皿固体菌种转接液体培养的MD-1，MO-1，MO-2和MA-1真菌可以直接使用，也可以作为种子菌种，种子菌种再进一步接入液体或固体培养基进行放大培养；真菌液体培养的培养基含有葡萄糖、无机盐类成分和天然添加物，真菌用三角瓶或其他容器振荡或发酵罐通气暗培养，培养结束后可直接使用或用匀浆机打碎培养产物备用；真菌固体培养的培养基含有天然纤维性或淀粉性物质，真菌用试管、玻璃罐头瓶或塑料袋等器皿静置暗培养，待菌丝大部分或全部长满培养基时取出备用；(2)石斛苗的培养石斛苗由石斛原球茎经过原球茎增殖、原球茎分化成苗、壮苗等步骤的培养，用玻璃三角瓶或玻璃罐头瓶等器皿静置光照培养，培育成苗；经壮苗后的石斛苗可以在继代培养基上继代培养；壮苗步骤可以将苗接在壮苗培养基上单独培养，也可以在壮苗培养的后期接入菌根真菌共生培养一段时间，再出瓶用于大面积栽培；原球茎增殖、原球茎分化成苗、壮苗、苗的继代培养等步骤所用的培养基是以1/2MS培养基为基本培养基，添加蔗糖、肌醇、琼脂，或添加活性炭、添加不同种类和浓度的植物激素，或添加马铃薯提取物；(3)石斛苗与菌根真菌的共生栽培、田间管理及收获石斛苗与菌根真菌大面积共生栽培的栽培基质含有树皮、树叶、蕨树根、锯末、刨花、木炭、石头、砖、蛭石、珍珠岩、腐殖土、泥炭土；石斛苗和菌根真菌按以下方法共生栽培：①地上遮阳栽培：在具有遮阳网的露天大棚，或塑料薄膜温室，或玻璃温室中进行栽培，栽培时先在石斛苗根的基部放置少量碎树叶，再在石斛苗根部放置以上备好的液体或固体菌根真菌适量，最后用栽培基质埋住石斛苗的根部；②立体遮阳栽培：在地上搭架分层立体栽培，在硬质材料的盆或盒等容器的底部平铺一层共生栽培基质，栽培时先在石斛苗根的基部放置适量碎树叶，再在石斛苗根部放置以上备好的液体或固体菌根真菌适量，最后用栽培基质埋住石斛苗的根部；在石斛生长的过程中可以根据需要补施液体或固体菌根真菌；石斛苗出瓶后与菌根真菌共生栽培2-3年后即可收获。