[发明专利]一种人甲状腺球蛋白抗体磁分离酶促化学发光免疫检测方法

摘要

本发明提供了一种人甲状腺球蛋白抗体磁分离酶促化学发光免疫检测方法，属于免疫检测分析技术领域。将抗原人甲状腺球蛋白连接在四氧化三铁微球表面作为固相试剂，四氧化三铁微球的直径在0.1－5.0微米之间，经捕捉样本中的自身抗体人甲状腺球蛋白抗体以及二抗酶标试剂后，形成固相－抗原－抗体－酶标二抗夹心免疫复合物。本发明的优点在于：使用磁珠为固相，使免疫反应更接近液相，反应更充分和迅速，而且使结合的免疫复合物更加容易分离，降低了非特异性吸附。使用的二抗为单克隆抗体混合物，使免疫反应的亲和力更高，而且单抗的生产批间差异相对小，更容易保证产品的批间稳定。

主权项

1、一种人甲状腺球蛋白抗体磁分离酶促化学发光免疫检测方法，其特征在于：将抗原人甲状腺球蛋白连接在四氧化三铁微球表面作为固相试剂，四氧化三铁微球的直径在0.1-5.0微米之间，经捕捉样本中的自身抗体人甲状腺球蛋白抗体以及二抗酶标试剂后，形成固相-抗原-抗体-酶标二抗夹心免疫复合物；所述的抗原与四氧化三铁微球磁珠的连接为直接的或间接的；所述的二抗酶标试剂中使用的酶是碱性磷酸酶EC3.1.3.1；所述的二抗酶标抗体试剂中使用的二抗为动物抗人免疫球蛋白的多克隆抗体，或是上述的鼠抗人免疫球蛋白单克隆抗体的混合物，这些混合物包括鼠抗人免疫球蛋白A单克隆抗体，鼠抗人免疫球蛋白E单克隆抗体，鼠抗人免疫球蛋白M单克隆，抗体鼠抗人免疫球蛋白G单克隆抗体，鼠抗人免疫球蛋白D单克隆抗体，鼠抗人免疫球蛋白κ链单克隆抗体，以及鼠抗人免疫球蛋白λ链单克隆抗体；所述的二抗酶标试剂的偶联方法是使用活化剂N-琥珀酰胺3-(2-吡啶二巯基)丙酸[SPDP]活化抗体，使用Traunt’s试剂活化碱性磷酸酶，然后二者以1∶2～2∶1的比例混合，并使用凝胶层析纯化酶标偶联物；所使用的底物溶液为环二氧乙烷类衍生物。