[发明专利]酵母疫苗生产方法

摘要

本发明公开了一种生产酵母疫苗的方法，该方法是实现基因重组酵母从实验室小试到工业化生产的突破技术。本发明的生产步骤包括：1.构建酵母疫苗载体种子库；2.种子放大培养；3.疫苗原液的制备；4.疫苗热灭活；5.半成品的冻干；6.分装和储藏。采用此生产方法生产酵母疫苗具有良好的可控制性和可操作性，能有效保持疫苗产品的生物活性，具有较高的生产效率。

主权项

1.一种生产酵母疫苗的方法，适用于生产多种防治疾病的疫苗包括传染性和非传染性疾病。包括以下主要步骤：1)杂交酵母疫苗系统的构建应用基因工程技术构建酵母疫苗载体，将病原体抗原基因和细胞因子基因克隆到酵母质粒上，经酵母转化后筛选出含有表达目的基因的疫苗产品作为种子疫苗冻存保种；2)疫苗种子放大培养取冻存疫苗种子加入到氨基酸缺陷型选择性酵母培养基中发酵培养酵母至所需密度；3)疫苗原液的制备取种子放大培养产物接种到较大体积氨基酸缺陷型选择性酵母培养基中放大培养酵母，在培养基中可根据质粒中的启动子特性加入诱导剂诱导目的基因表达，发酵培养至所需密度时终止，然后用无菌注射用水离心洗涤菌体并稀释菌液至指定终浓度，4℃保存备用；4)疫苗热灭活：取疫苗原液，置于加热65-85℃的水浴中，期间不断混匀，到所定时间时即为疫苗半成品，4℃保存备用；5)半成品的冻干：包括疫苗的冷冻干方法，赋形剂选用不同浓度的甘露糖或其它赋形剂成份。2.1中所说的生产酵母疫苗生产方法，其特征在于：产品通过酵母种子疫苗在发酵体系中扩增、水浴高温灭活、冷冻干燥和分装控制器组成的体系制备。3.1中所说的酵母种为啤酒酵母Saccharomyces cerevisiae和由此衍生出的不同种系。4.1中所说的传染性疾病疫苗包括艾滋病、非典、肝炎、流感。5.1中所说的非传染性疾病疫苗包括癌症、风湿性关节炎、过敏性疾病、老年痴呆症。6.1中所说的冷冻干方法，包括使用各种冻干仪摸索出的各种冻干曲线。