[发明专利]重组人睫状神经营养因子突变体及其制备方法无效
| 申请号： | 200510066193.1 | 申请日： | 2005-04-21 |
| 公开（公告）号： | CN1687413A | 公开（公告）日： | 2005-10-26 |
| 发明（设计）人： | 朱俊铭;雷继军;李清雄;王革非;余永恒;张晓林;张光勋;文力 | 申请（专利权）人： | 梁亮胜 |
| 主分类号： | C12N15/12 | 分类号： | C12N15/12;C12N15/63;C12N15/70;C12N1/21;C12P21/02;C07K14/435 |
| 代理公司： | 北京集佳知识产权代理有限公司 | 代理人： | 刘继富;顾晋伟 |
| 地址： | 430019湖北省*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | 本发明涉及重组蛋白和其制备方法，具体涉及重组人睫状神经营养因子(简称hCNTF)突变体及其制备方法，更具体的说，本发明涉及用乳糖诱导hCNTF突变体在大肠杆菌BL21(DE3)中高效可溶表达、并从中加以分离纯化的方法，以及通过该方法制备的hCNTF突变体。 | ||
| 搜索关键词： | 重组 人睫状 神经 营养 因子 突变体 及其 制备 方法 | ||
【主权项】：
1.一种制备hCNTF突变体的方法，包括下列步骤：(a)将hCNTF突变体基因序列克隆入表达载体以得到重组载体，并导入大肠杆菌中，生成含有重组载体的基因工程菌；(b)培养基因工程菌至OD600＝12～14时，加入乳糖，诱导hCNTF突变体在基因工程菌中可溶性表达；(c)诱导后，向培养液中缓慢加入葡萄糖作为主要碳源，并控制培养液中溶解氧值为10％～15％，继续培养；(d)待基因工程菌的OD600＝20-30时，收获菌体，并将菌体破碎得到破菌液；(e)纯化破菌液，得到纯化产品。
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