[发明专利]九孔鲍免疫因子特异抗体的制备及其检测方法无效
| 申请号： | 200510061771.2 | 申请日： | 2005-12-02 |
| 公开（公告）号： | CN1775807A | 公开（公告）日： | 2006-05-24 |
| 发明（设计）人： | 吴信忠;姜玉声;吴刘记 | 申请（专利权）人： | 浙江大学 |
| 主分类号： | C07K16/18 | 分类号： | C07K16/18;C12N15/09;G01N33/577 |
| 代理公司： | 杭州中成专利事务所有限公司 | 代理人： | 陈祯祥 |
| 地址： | 310027浙江省杭*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | 九孔鲍免疫因子特异抗体的制备及其检测方法，该抗体的制备是先设计核转录因子(NF－kB)的特异引物，寻找比对编码框，将DNA结合域(DBD)和转录激活域(TAD)的编码框连入原核表达载体，转化大肠杆菌，经凝胶亲和柱纯化后，注射家兔得九孔鲍核转录因子的DBD和TAD两个多克隆抗体，该抗体可以用普通间接ELISA检测抗体效价。用两种抗体对九孔鲍核转录因子进行蛋白杂交(Western blotting)检测；亦可利用双抗体与二抗联用间接夹心酶联免疫反应试验(ELISA)检测九孔鲍核转录因子。本发明提供一种对养殖贝类，特别是九孔鲍免疫因子的检测技术，有助于对贝类分子免疫机理的研究，进而有助于利用现代生物技术防治贝类病害。 | ||
| 搜索关键词： | 九孔 免疫 因子 特异 抗体 制备 及其 检测 方法 | ||
【主权项】：
1、九孔鲍免疫因子特异抗体的制备方法，其特征是包括以下操作步骤：(1)设计鲍核转录因子NF-kB的特异引物，利用3′和5′RACE扩增原理从九孔鲍血淋巴细胞中克隆NF-KB基因的全长序列，使用生物信息软件寻找比对正确的编码框；(2)将编码DNA结合域DBD和转录激活域TAD的编码框插入PGEX-4T-2原核表达载体，转化大肠杆菌BL21；(3)表达产物经谷胱甘肽凝胶亲和柱纯化后，分别注射家兔得到相应的抗九孔鲍核转录因子的DBD和TAD两个多克隆抗体。
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