[发明专利]柑桔溃疡病菌实时荧光PCR检测引物、探针、固相化试剂盒及其检测方法

摘要

本发明涉及用于柑桔溃疡病菌检测的寡核苷酸引物、柑桔溃疡病菌实时荧光PCR检测探针、固相化试剂盒及其检测方法，它是专门针对柑桔溃疡病而建立的一种快速检测方法，从制样到检出时间仅需3小时，而且检测灵敏度高、特异性强、稳定可靠。该方法不仅克服了现有的依据症状学的常规诊断方法时有误判、电镜观察法因菌体分布不均容易漏诊、单克隆抗体法因抗体制备难度大，且有非特异反应等不足；而且可以避免常规PCR的假阴性和假阳性。固相化试剂盒操作方便，使用简单；检测方法灵敏度高、特异性强、稳定可靠；适合于进出口柑桔鲜果的口岸检疫；柑桔种苗、接穗等无症带菌材料的调运检疫检验以及非疫区柑桔黄龙病的早期预警监测。

主权项

1、一种用于柑桔溃疡病菌检测的寡核苷酸引物，包括：寡核苷酸引物对：5’-CGG CAG ATT GGA AGT CA-3’ 5’-TCC AGC ACA TAC GGG TC-3’ (序列号：NO.1)；寡核苷酸引物对：5’-GTT CGG CGT CAA CAA C-3’ 5’-CGG TAG GCG ACT CAT TT-3’ (序列号：NO.2)；寡核苷酸引物对：5’-GAG TCG CCT ACC GAG AAA TCC-3’ 5’-ACC ACG GCA GGG TGA AGA C-3’ (序列号：NO.3)； 寡核苷酸引物对：5’-CGT CAA CAA CCT GGA GAG CA-3’ 5’-GGT AGG CGA CTC ATT TCC CA-3’ (序列号：NO.4)。