[发明专利]脂联素-胰升糖素样肽-1类似肽融合蛋白表达载体及构建无效

专利信息
申请号: 200510050844.8 申请日: 2005-07-22
公开(公告)号: CN1737150A 公开(公告)日: 2006-02-22
发明(设计)人: 赵同峰;谷卫;詹宇红;赵江佩 申请(专利权)人: 浙江大学
主分类号: C12N15/62 分类号: C12N15/62;C07K19/00;C12N15/70;C12N15/74
代理公司: 杭州求是专利事务所有限公司 代理人: 赵杭丽;张法高
地址: 310027浙*** 国省代码: 浙江;33
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摘要: 发明公开了人脂联素-胰升糖素样肽-1类似肽融合蛋白表达载体及构建方法。本发明运用PCR技术获得人脂联素和GLP-1-A编码基因,脂联素基因通过扩增脂联素球状域基因获得,通过将人GLP-1(7-37)编码基因中编码第8位氨基酸丙氨酸的密码子突变为甘氨酸密码子获得GLP-1-A编码基因,运用酶切技术,将GLP-1-A和脂联素编码基因定向克隆到表达载体,获得人脂联素-胰升糖素样肽-1类似肽融合蛋白表达载体,经转化蛋白表达细菌表达出了含肠激酶识别序列的人Adiponectin-GLP-1-A融合蛋白,本发明为进一步研究其活性,测定融合蛋白上GLP-1-A半衰期,得到能促进胰岛β细胞分泌胰岛素、能改善胰岛素抵抗、副作用小的新蛋白提供良好的前期研究。
搜索关键词: 脂联素 胰升糖素样肽 类似 融合 蛋白 表达 载体 构建
【主权项】:
1.人脂联素-胰升糖素样肽-1类似肽融合基因的cDNA序列,其特征是:全长共567个bp,1-15bp编码肠激酶识别序列,16-108bp编码人GLP-1-A,序列长93bp,其中19-21bp将人GLP-1(7-37)编码基因中编码第8位氨基酸丙氨酸的密码子GCT突变为甘氨酸密码子GGT,109-153bp编码接头肽DNA序列,序列长45bp,154-564bp编码脂联素,序列长411bp,565-567bp为终止密码子,该融合基因cDNA序列见SEQ ID NO 1。
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