[发明专利]诱导稻瘟病菌产生致病性蛋白的方法无效

专利信息
申请号: 200510048728.2 申请日: 2005-12-22
公开(公告)号: CN1807586A 公开(公告)日: 2006-07-26
发明(设计)人: 李成云;朱有勇;周江鸿;杨静;苏源;周晓罡;李进斌;王云月;刘林;业艳芬;叶敏 申请(专利权)人: 云南农业大学
主分类号: C12N1/20 分类号: C12N1/20;C12P21/02
代理公司: 昆明正原专利代理有限责任公司 代理人: 刘明哲
地址: 650201云南*** 国省代码: 云南;53
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摘要: 发明涉及一种诱导稻瘟病菌产生致病性蛋白的方法,属于植物保护领域。本发明的技术方案是将斜面上保存的稻瘟病菌株接种在普通固体培养基,28℃下扩繁。形成较大的菌落后,转接到50mL的普通液体培养基中,28℃ 150rpm振荡培养3天后,培养液用无菌水冲洗,至菌丝块无色。将冲洗好的菌丝块转接到50mL致病蛋白诱导培养基中,28℃150rpm振荡培养48小时。菌液抽滤、冻干后得到稻瘟菌分泌蛋白的提取物,-20℃保存。此方法可以诱导稻瘟病菌大量产生致病性相关蛋白,填补了国内外稻瘟病菌致病机理研究中不能获得致病蛋白的空白,意义重大。
搜索关键词: 诱导 稻瘟病 产生 致病性 蛋白 方法
【主权项】:
1、诱导稻瘟病菌产生致病性蛋白的方法,其步骤为:(1)将斜面上保存的稻瘟病菌株接种在普通固体培养基上,28℃下培养;普通固体培养基由以下成分组成:葡萄糖15g/L、酵母粉5g/L、琼脂粉12g/L、H2O1L;(2)形成较大的菌落后,用接种针挑取3块约0.5cm2的菌丝块,转接到50mL的普通液体培养基中,28℃150rpm振荡培养;3天后在无菌状态下,用2层沙布过滤,滤出的菌丝块用无菌水冲洗至无色;普通液体培养基主要由以下成分组成:Na3C6H5O7-2H2O 2.5g/L、KH2PO4 5.6g/L、NH4NO3 2.0g/L、MgSO4-7H2O 0.2g/L、CaCl2-H2O 0.1g/L、Biotin 5.0μg/L、Thiamine 10.0mg/L、Trace elements 0.1mL、Sucrose15g/L、H2O 1L;(3)将冲洗好的菌丝块转接到50mL致病蛋白诱导培养基中,28℃150rpm振荡培养48小时;致病蛋白诱导培养基主要由以下成分组成:Na3C6H5O7-2H2O 2.5g/L、KH2PO4 5.6g/L、MgSO4-7H2O 0.2g/L、CaCl2-H2O 0.1g/L、Biotin 5.0μg/L、Thiamine10.0mg/L、Trace elements 0.1mL、Sucrose 15g/L、H2O 1L;(4)将培养好的菌液抽滤、冻干后得到稻瘟菌分泌蛋白的提取物,-20℃保存。
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