[发明专利]快速检测IT15基因CAG重复序列动态突变的引物及方法

摘要

一种快速检测舞蹈病IT15基因CAG重复序列扩展突变的引物及方法，其特点是采用专门设计的特殊引物，通过两次PCR扩增将DNA量扩增至凝胶电泳可观察的程度，最后利用凝胶电泳直接观查IT15基因CAG重复序列动态突变情况。本发明的优点是：1.简单便宜，不需测序，一般分子生物学实验室或检验室就可操作，从而建立了一个简便易行的扩增CAG重复序列的快速检测方法。2.灵敏度高，25ng基因组DNA就足够检测Htt基因中CAG扩展突变，为临床诊断亨廷顿舞蹈病提供可靠的依据。

主权项

1、一种快速检测IT15基因CAG重复序列动态突变的引物，其特征在于：由对应第一步PCR扩增的第一对引物和对应第二步PCR扩增的第二对引物组成；所述第一对引物采用以下四对引物中的任意一对引物：(I)、 外源有义：5’CTTGCTGTGTGAGGCAGAACCTG-3’ 外源反义：5’GGCTGAGGAAGCTGAGGAG-3’(II)、 外源有义：5’TTCACACACAGCTTCGC-3’ 外源反义：5’CCTCCTCTCGAAGTGTCCCG-3’(III)、外源有义：5’GGCAGAGTCCGCAGGCTAG-3’ 外源反义：5’AAGTTCCATAGCGATGCCCAG-3’(IV)、 外源有义：5’CTAGGGCTGTCAATCATGCTGG-3’ 外源反义：5’AAGTTCCATAGCGATGCCCAG-3’所述第二对引物采用以下两对引物中的任意一对引物：(I)、 内源有义：5’GACCCTGGAAAAGCTGATG-3’ 内源反义：5’GGCTGAGGAAGCTGAGGAG-3’(II)、内源有义：5’ATGAAGGCCTTCGAGTCCCTCAAGTCCTTC-3’ 内源反义：5’GTCGGTGCAGCGGCTCC-3’。