[发明专利]多肽微波固相合成法

摘要

多肽微波固相合成法涉及的是一种微波辅助下的多肽固相合成方法。多肽微波固相合成法为：(1)氨基酸－树脂复合物的制备：加入二氯甲烷溶胀多肽合成树脂；在羧基端氨基酸和缩合试剂中加入溶剂，反应结束后过滤，将滤液加入树脂中，同时加入二甲氨基吡啶反应。(2)微波辐射脱除氨基保护基：在氨基酸－树脂复合物中加入脱保护试剂，微波辐射下反应。(3)微波辐射缩合氨基酸：溶解下一个氨基酸和缩合试剂，加入到氨基酸－树脂复合物中，微波辐射下反应。(4)更换氨基酸，重复(2)和(3)合成所需的多肽。(5)多肽粗品的制备：在合成的肽链中加入切割试剂，微波辐射。反应结束后过滤，旋转蒸发滤液，向余液中加入冰乙醚，析出多肽粗品。

主权项

1、一种多肽微波固相合成法，其特征在于微波固相合成法为：(1)氨基酸-树脂复合物的制备：称量一份多肽合成树脂，放入带过滤装置的反应器中，向其中加入二氯甲烷，溶胀树脂30～120min，然后抽掉二氯甲烷溶液，称量羧基端氨基酸和缩合试剂——二环己基碳二亚胺或二异丙基碳二亚胺和1-羟基苯丙三氮唑，放入可以密封的容器中，加入二甲基甲酰胺或四氢呋喃，反应30～150min，所述的氨基酸和树脂物质的量的比为7～3∶1；氨基酸和缩合试剂物质的量的比为1∶1～1.2，反应结束后，过滤掉沉淀，将滤液加入到装有树脂的带过滤装置的反应器中，同时加入二甲氨基吡啶，反应3～20个小时，其中二甲氨基吡啶和树脂物质的量的比为0.5～0.1∶1，然后抽掉反应液，用二甲基甲酰胺、甲醇、二氯甲烷依次洗涤树脂三次；(2)微波辐射脱除氨基保护基：在上面洗涤得到的氨基酸-树脂复合物中加入脱保护试剂——20～30％的哌啶/二甲基甲酰胺溶液，然后将置于微波反应器中反应，微波条件是：温度为20～70℃，反应时间为3～10min，反应完毕后，过滤抽掉溶液，用二甲基甲酰胺、甲醇、二氯甲烷洗涤树脂；(3)微波辐射缩合氨基酸：称量下一个保护氨基酸和缩合试剂，放入可以密闭的容器中，加入溶剂溶解，所述的氨基酸和树脂物质的量的比为4～2∶1；氨基酸和缩合试剂物质的量的比为1∶1～1.2，所述的溶剂为：二甲基甲酰胺、吡啶、N-甲基吡咯烷酮、四氢呋喃，然后将溶液加入到装有脱除氨基保护基的氨基酸-树脂复合物的反应器中，置于微波反应器中反应，微波条件是：温度为20～70℃，反应时间为3～10min，反应完毕后，抽掉反应液，用二甲基甲酰胺、甲醇、二氯甲烷洗涤树脂；(4)按照氨基酸从羧基端到氨基端的顺序，更换氨基酸，重复微波辐射脱保护和微波辐射缩合氨基酸的反应，合成所需的多肽；(5)多肽粗品的制备：将上面得到的保护肽-树脂放入可以密闭的容器中，加入切割试剂，微波辐射下反应，微波条件为：温度30～60℃，反应时间为10～20min，然后过滤掉树脂，收集滤液，旋转蒸发除去三氟乙酸，向剩下的液体中加入冰乙醚，沉淀出多肽，然后离心，去除上清液，得到所需的多肽粗品。