[发明专利]生产包含类胡萝卜素的生物质的方法

摘要

本发明涉及包含类胡萝卜素的生物质的生产方法。本发明的目的是提供包含类胡萝卜素的生物质的生产方法，其可以在大规模上以低水平的复杂性和不需使用抗生素来实现。为此目的，本发明提供将具有提高的β－胡萝卜素的合成和贮存能力的非基因改造的异宗配合真菌培养在浸沉培养物中，由此所述生物质以多阶段，只从孢子中按照(+)和(－)配型分别进行增殖。在所述生产发酵之前的最后的生物质增殖期完成后，将(+)配型的生物质或(+)配型的培养液或(+)配型的匀浆化生物质或，代替(+)配型的配素型的刺激物或内酯或三孢酸或三孢酸衍生物加入(－)配型的生物质，并且在熟化时期持续数小时后，将该浸沉混合物转移到产品发酵的营养液中。所述营养液以这样的方式组成从而使得在时间t_w，生物质的生长期被磷限制所终止，另外β－胡萝卜素的合成通过产生短期应激环境而引发，并且通过在生长期中的磷限制使从得到的干生物质中无溶剂提取β－胡萝卜素成为可能。

主权项

1.产生包含β-类胡萝卜素的生物质的方法，该方法基于借助异宗配合的真菌在浸沉培养物中的微生物合成来进行，所述异宗配合的真菌通过诱变进行改造并且具有提高的合成和贮藏β-胡萝卜素的能力，所述方法的特征在于，-在多阶段中，所述生物质只从孢子中按照(+)和(-)配型分别进行增殖，-在用无离子水洗涤后，将(+)和(-)配型的孢子在-80℃到-85℃甘油保护的条件下贮存在密封管中，-在所述生产发酵之前的最后的生物质增殖期结束后，将(+)配型的生物质或(+)配型的培养液或(+)配型的匀浆化生物质或配素型的刺激物或内酯或三孢酸或三孢酸衍生物加入(-)配型的生物质，-在1-5小时的时间依赖型交配或诱导时间后，将该浸沉混合物转移到生产发酵的营养液中，其中所述营养液以这样的方式组成，即使得被磷比率所限制的生物质的生长期在时间tw被完全终止，-另外通过产生温度和氧应激环境3-7小时来引发在产物培养物中的β-胡萝卜素的合成，-其中依靠只是在被磷比率限制的生长期后，不再将无机磷化合物加入所述培养基中来对所述菌株进行磷限制而使从获得的干生物质中无溶剂提取β-胡萝卜素成为可能。