[发明专利]作为慢性肝炎治疗性疫苗的稳定化HBc嵌合体颗粒

摘要

公开了一种治疗慢性乙型肝炎的方法，所述方法包括将T细胞刺激量的疫苗给予患者。所述疫苗包含免疫原性量的嵌合的羧基端截短的乙型肝炎病毒核壳(核心)蛋白(HBc)，所述蛋白经改造而增强了自我装配颗粒的稳定性并且其颗粒基本上不结合核酸。所述嵌合蛋白分子可包含一个或多个免疫原性表位，所述表位以肽键连接在HBc的N末端、免疫原性环和C末端中的一个或多个。因邻近所述嵌合分子的氨基端和羧基端的一端或两端存在至少一个异源半胱氨酸残基，从而获得了自我装配颗粒的增强的稳定性。

主权项

1.一种治疗慢性肝炎的方法，所述方法包括：(a)给予慢性感染乙型肝炎病毒的患者T细胞刺激量的疫苗，所述疫苗包含溶解或分散在药物可接受的稀释剂中的免疫原性颗粒，所述免疫原性颗粒包含重组乙型肝炎核心(HBc)嵌合蛋白分子，所述嵌合蛋白分子长度至多约为550个氨基酸残基并且含有(i)HBc分子N端165个氨基酸残基中至少约125个氨基酸残基的HBc序列，所述HBc分子包含4至约75位残基和约85至约140位残基的HBc序列，并且任选包含(a′)以肽键连接的免疫原性表位，所述免疫原性表位位于所述嵌合体的N末端、HBc优势免疫环中和C末端中的一个或多个；或(b′)在HBc优势免疫环中的插入序列，所述插入序列的长度为1个至约40个氨基酸残基并且包含用于缀合半抗原的化学反应性接头残基，(ii)以下(a′)和(b′)之一或它们两者：(a′)序列中其氨基酸位置不同于HBc前核心序列的1-3个半胱氨酸残基，所述半胱氨酸残基在所述嵌合分子中的氨基酸位置对应于从SEQ ID NO：1的HBc序列N端计算的氨基酸位置-20至约+1，即N端半胱氨酸残基；和(b′)位于从所述HBc序列C端残基开始向所述嵌合分子C端方向并且位于所述嵌合分子C端的约30个残基内的1个至约3个半胱氨酸残基，即C端半胱氨酸残基，所述嵌合分子(a′)所含有的HBc序列中的保守取代氨基酸残基不大于约20％，(b′)在宿主细胞中表达后自我装配成颗粒，所述颗粒基本上不结合核酸，和所述颗粒比由除了以下两点不同之外其他方面都相同的HBc嵌合分子所形成的颗粒更稳定：不含任何上述C端半胱氨酸残基或N端半胱氨酸残基，或者其中所提出的嵌合分子中存在的C端半胱氨酸残基或N端半胱氨酸残基被其它残基取代；和(b)让所述患者保持足够时间以诱导出抗HBc的活化T细胞。