[发明专利]核酸聚合酶链式反应扩增的优化方法无效
| 申请号： | 200410099186.7 | 申请日： | 2004-12-29 |
| 公开（公告）号： | CN1661029A | 公开（公告）日： | 2005-08-31 |
| 发明（设计）人： | 李海阔;黄洁欢;吕军鸿;张晓东;张治洲;胡钧 | 申请（专利权）人： | 上海交通大学 |
| 主分类号： | C12P19/34 | 分类号： | C12P19/34 |
| 代理公司： | 上海交达专利事务所 | 代理人： | 王锡麟;王桂忠 |
| 地址： | 200240*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 一种核酸聚合酶链式反应扩增的优化方法，通过向PCR体系中添加单质金材料来实现对PCR扩增的优化，具体如下：(1)单质金材料制备，①金箔、金片、金丝或金粉的制备，②镀金薄膜的制备，③胶体金制备；(2)单质金材料灭菌；(3)PCR体系优化；(4)PCR产物检测；(5)优化材料从反应结束体系中的分离，需要回收扩增得到的PCR产物，则可从反应结束体系中分离出优化材料。本发明具有优化扩增的效果显著，制备简便，成本低廉，易于保存，应用广泛，优化材料易于从体系中分离的优点。对基因检测与克隆、遗传分析、临床诊断、基因芯片以及新材料等领域有着潜在而巨大的应用价值。 | ||
| 搜索关键词： | 核酸 聚合 链式反应 扩增 优化 方法 | ||
【主权项】：
1、一种核酸聚合酶链式反应扩增的优化方法，其特征在于，通过向PCR体系中添加单质金材料来实现对PCR扩增的优化，具体如下：(1)单质金材料制备，是指：①金属金的制备：金箔或金片或金丝依次在稀硝酸、水、无水乙醇中清洗，晾干备用，金粉依次在水、无水乙醇中清洗、沉淀，烘干备用，②镀金薄膜的制备：以片状或颗粒状任何材料为基底，制备得到镀金表面，备用，③胶体金试剂利用现有技术制备；(2)单质金材料灭菌，所述的金箔、金丝、金粉、镀金薄膜使用前用干法、湿法或紫外线辐照灭菌；(3)PCR体系优化，将适量的以上任一种材料加入PCR反应体系当中进行PCR扩增；(4)PCR产物检测，对扩增后的DNA样品进行琼脂糖凝胶电泳，检查扩增条带，与对照体系进行比较；(5)优化材料从反应结束体系中的分离，需要回收扩增得到的PCR产物，则可从反应结束体系中分离出优化材料。
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