[发明专利]姬松茸菌胞外多糖生产方法

摘要

本发明公开了一种姬松茸菌胞外多糖生产方法，该方法优化了生产培养基的配方，改良了发酵与提取工艺，包括菌种制作、种子培养基配制与接种培养、生产培养基接种培养及多糖提取、纯化等步骤，显著提高了该菌所产胞外多糖的质量与纯度，使胞外多糖产量达825.2mg/L，本发明工艺简单，成本低廉，可工业化推广应用。

主权项

1.姬松茸菌胞外多糖生产方法，其特征在于该生产培养基的组分与含量(重量％)及其生产步骤，条件如下：其中，生产培养基为：葡萄糖，蔗糖，红糖或蜂蜜中的一种或二种以上混合物 1-6％；酵母膏或蛋白胨或与尿素、硫酸铵、KNO3中的一种或二种以上的混合物 0.2-1.0％K2HPO4 0.1-0.6％MgSO4 0.05-0.3％生产步骤，条件为：(1)菌种制作：将姬松茸菌种接种在PDA斜面培养基上，于25～28℃恒温培养7～10天后，置于4℃左右的冰箱中保存备用；(2)种子培养基配制与接种培养：液体种子培养基配方(重量％)为葡萄糖2％，酵母膏0.2％、K2HPO4 0.2％、MgSO4 0.05％、pH调整到6，灭菌后将步骤(1)所制菌种活化培养后的菌丝体接入，在28～30℃下静止培养5天；(3)生产培养基接种培养：将步骤(2)培养的菌丝体经消毒水洗，打碎配成菌丝悬浮液后，按每升培养液接100毫克湿润菌丝体计，接入上述生产培养基中，在28～30℃下静止培养8天，约有50％培养液呈胶冻状后终止发酵；(4)多糖提取及纯化：用超声波处理步骤(3)发酵液直到菌丝体和胞外多糖完全分开，过滤去除菌丝体，在滤液中加3倍体积95％乙醇沉淀多糖，于冰箱内静止过夜，离心收集多糖后，用丙酮、乙醚、乙醇交替洗涤多糖，再用蒸馏水溶解多糖，超声波助溶，静止2～4小时，离心去除不溶物，再在滤液中加3倍体积95％乙醇沉淀多糖，于冰箱内静止过夜，离心得姬松茸菌胞外多糖纯品。