[发明专利]高表达HBsAg的乙型病毒性肝炎小鼠模型的制备方法无效
| 申请号： | 200410075550.6 | 申请日： | 2004-12-21 |
| 公开（公告）号： | CN1679967A | 公开（公告）日： | 2005-10-12 |
| 发明（设计）人： | 孙汶生;刘玉刚;张秋;高立芬;石永玉;刘素侠;朱法良;郭春 | 申请（专利权）人： | 山东大学 |
| 主分类号： | A61K49/00 | 分类号： | A61K49/00 |
| 代理公司： | 济南三达专利事务所 | 代理人： | 李健康 |
| 地址： | 250012山东*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种高表达HBsAg的乙型病毒性肝炎小鼠模型的制备方法，由以下步骤组成：(1)载体构建：载体pcDNA3经EcoR V线性化后用牛小肠碱性磷酸酶使其去磷酸化，重组克隆载体p3.6II经Pvu II酶切后获得1.1倍的HBV基因片段，以T4 DNA连接酶连接1.1倍HBV DNA片段和线性化的pcDNA3；转化大肠杆菌感受态细胞DH5α，经抗性筛选、酶切、测序鉴定重组质粒；(2)将含有1.1倍HBV DNA的重组载体利用尾静脉高压注射的方法导入动物体内，建立高表达HBsAg的乙型病毒性肝炎小鼠模型；(3)模型鉴定。本发明的方法制作过程简单易行，能广泛推广应用；制作过程时间短，对实验动物的损伤小，动物死亡率低；获得的模型能高水平的表达HBsAg，亦能较高水平的表达HBeAg。模型可作为乙肝治疗药物的筛选平台，用于HBV感染的基础研究和临床相关研究。 | ||
| 搜索关键词： | 表达 hbsag 病毒性肝炎 小鼠 模型 制备 方法 | ||
【主权项】：
1.一种高表达HBsAg的乙型病毒性肝炎小鼠模型的制备方法，由以下步骤组成：(1)载体构建：载体pcDNA3经EcoR V线性化后用牛小肠碱性磷酸酶使其去磷酸化，重组克隆载体p3.6II经Pvu II酶切后获得1.1倍的HBV基因片段，以T4 DNA连接酶连接1.1倍HBV DNA片段和线性化的pcDNA3；转化大肠杆菌感受态细胞DH5α，经抗性筛选、酶切、测序鉴定重组质粒；(2)将含有1.1倍HBV DNA的重组载体利用尾静脉高压注射的方法导入动物体内，建立高表达HBsAg的乙型病毒性肝炎小鼠模型；(3)模型鉴定。
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