[发明专利]用磷脂脂肪酸谱图技术分析土壤微生物群落的多样性

摘要

本发明涉及一种用于分析土壤微生物群落多样性的生物化学方法，即用磷脂脂肪酸谱图技术分析土壤微生物群落的多样性。具体步骤如下：1)称量一定量的土壤材料；2)加入缓冲液和有机溶剂，获得含有脂质的有机相；3)有机相经硅酸柱分离，收集含有极性脂质的洗脱液；4)收集的洗脱液在碱性环境下进行甲酯化反应，得到脂肪酸甲酯；5)使用气相色谱－质谱联用仪定量分析脂肪酸甲酯，得到样品中不同种类磷脂脂肪酸的含量；6)计算多样性指数，判断土壤微生物群落的多样性情况。这一发明对研究微生物群落多样性及相关研究，特别是对准确评价农田生态、并对其将来的发展进行预测具有十分重要的实际意义，提供了准确、快速的手段。

主权项

1一种分析土壤样品微生物群落多样性的方法，包括以下步骤：a)选择用于实验的土壤材料；b)称量一定量步骤a)中的土壤材料，加入缓冲液和有机溶剂，获得含有脂质的有机相；c)将步骤b)获得的有机相经过硅酸柱分离，分别用不同的有机溶剂洗脱，收集含有极性脂质的洗脱液；d)将步骤c)获得的含有极性脂质的洗脱液在碱性环境下进行甲酯化反应；e)将步骤d)得到的溶液与有机溶剂混合，提取有机相；f)将步骤e)得到的有机相用高纯氮气吹干，提取到含有一定量内标的有机溶剂中；g)使用气相色谱-质谱联用仪定量分析步骤f)中得到的溶液，分析得到样品中不同种类磷脂脂肪酸的含量；h)使用步骤g)中得到的数据，计算多样性指数，判断土壤样品微生物群落的多样性情况。