[发明专利]一种具有抗肿瘤活性的茯苓菌丝体胞外多糖的制备方法

摘要

本发明涉及一种具有抗肿瘤活性的茯苓菌丝体胞外多糖的制备方法，采用野生茯苓菌种在pH值为5.0～6.0的玉米浆培养基中用经高压灭菌的发酵罐进行茯苓菌丝体深层发酵；收聚培养液；采用喷雾干燥机干燥得到胞外粗多糖；用蒸馏水将胞外粗多糖溶解，过滤后用H₂O₂脱色，用Sevag法除去游离的蛋白质，然后分别用清水和二次蒸馏水透析5～7天和3～5天，减压蒸馏，冷冻干燥得纯胞外多糖。体内活性实验表明，这种水溶性杂多糖对植入小鼠体内的Sarcoma 180肿瘤的生长具有明显的抑制作用，而且无毒副作用。体外活性实验表明，该类多糖对人体急性白血病毒细胞(HL－60)的增殖有显著的抑制效果，而且不会破坏正常猴肾细胞的生长。

主权项

1.一种具有抗肿瘤活性的茯苓菌丝体胞外多糖的制备方法，其特征在于：采用华中农业大学提供的野生茯苓菌种wolf Poria cocos在pH值为5.0～6.0的玉米浆培养基中用经高压灭菌的发酵罐进行茯苓菌丝体深层发酵；培养温度25～30℃，罐内压力0.7～0.9Mpa，空气流量为发酵罐体积的0.5～1倍/分钟，搅拌速度120～200rpm；发酵48～72小时，然后空气流量加大到发酵罐体积的1～1.5倍/分钟；总共发酵7～10天，收集培养液；采用喷雾干燥机干燥得到胞外粗多糖，干燥机的入口温度250℃，出口温度70～80℃；用蒸馏水将胞外粗多糖溶解，过滤后用20～30wt％H2O2脱色，用Sevag法除去游离的蛋白质，反复进行9～12次，然后分别用清水和二次蒸馏水透析5～7天和3～5天，减压蒸馏，冷冻干燥得纯胞外多糖。