[发明专利]木霉菌厚垣孢子的生产方法

摘要

一种木霉菌厚垣孢子的生产方法，利用从作物根表土壤分离获得的木霉菌，采用控制营养条件、添加形成厚垣孢子促进剂，调节温度、pH值、接菌量、供氧量及搅拌速度等技术参数控制发酵条件使其产生厚垣孢子，首先将取自作物根际的木霉菌纯化后转移至试管斜面内作母菌种，然后在三角瓶内振荡培养为液体菌种，再经生产罐发酵制成厚垣孢子悬浮液。本发明所得的厚垣孢子具有寿命长、防效高、耐储存等优点，其制剂比分生孢子制剂可提高商品货价期一年以上。

主权项

1.一种木霉菌厚垣孢子的生产方法，其特征在于包括如下具体步骤：1)斜面母菌种制备：取作物根表土壤5-10克，加无菌水50-100毫升，经振荡后稀释1000-10000倍成稀释液；取马铃薯150-200克、葡萄糖15-20克、孟加拉红0.04-0.07克、硫酸链霉素0.03-0.04克、琼脂17-20克、水1000毫升，配制成菌种培养液；将稀释液与菌种培养液按0.1-1∶10-15的比例一起倒入培养皿内制成培养基平板，然后在25-28℃下培养48小时，经分离获得木霉菌菌株，经纯化后转移至试管斜面内作斜面母菌种；2)二级菌种制备：取马铃薯150-200克、葡萄糖或蔗糖15-25克、水1000毫升，调pH值为6-6.5，配制成二级发酵培养液，分装在250-1000毫升三角瓶中，装液量为100-500毫升，在121℃下灭菌20-30分钟，在无菌室内将斜面母菌种转入摇瓶，摇床转速为150-170转/分，发酵温度28-30℃，发酵时间为3-4天，得到二级菌种；3)生产罐发酵：厚垣孢子培养基配方为：马铃薯150-200克，葡萄糖或蔗糖15-20克，磷酸二氢钾1-2克，硫酸镁0.5-1克，色氨酸2-4克，果糖2-4克，植物油2-4克，自来水1000毫升；将厚垣孢子培养基在121℃下灭菌30-40分钟，二级菌种接菌量为2-5％，发酵温度为25-28℃，pH值为5-6.5，供氧量150-200kpa，搅拌速度为120-150转/分，发酵时间5-7天，获得木霉菌厚垣孢子悬浮液。