[发明专利]富铬啤酒酵母的制备工艺

摘要

本发明公开了一种富铬啤酒酵母的制备工艺。它是将挑取的啤酒酵母单菌落经二级种子培养再转种上罐发酵，在pH5.6～6.0，温度27～29℃条件下培养9～11小时至OD₆₀₀≥9.0；再调节pH值到5.5～5.6，开始补加Cr³⁺，至Cr³⁺浓度达到0.10～0.15g/l发酵液时，停止补加；补加完Cr³⁺后，继续补加麦芽汁，补加体积为发酵始体积的30～50％，补加速度匀速递增，培养至麦芽汁全部补完；麦芽汁补加结束后，继续发酵，到总发酵时间达40～50小时后下罐。将下罐菌体悬液离心收集菌体，用超纯水清洗菌体，喷雾干燥，收集干菌粉，干菌粉生物活性铬达到222～318微克/克干酵母。本发明方法采用酵母细胞先发酵培养9～11小时，再按梯度加入法加入铬离子，提高了酵母的GTF含量；仅采用麦芽汁培养基，工艺简单适用。

主权项

1.一种富铬啤酒酵母的制备工艺，其特征在于它包括：(一)种子培养：(1)一级种子培养：挑取啤酒酵母单菌落一个置于50％麦芽汁培养基中，在PH4.5～5.5，温度为27～29℃的条件下振荡培养20～24小时，至OD600≥2.0；(2)二级种子培养：将一级种子按10％接种量接入50％麦芽汁培养基中，在PH4.5～5.5，温度为27～29℃的条件下振荡培养20～24小时，至OD600≥4.0；(二)上罐发酵：将二级种子按10％转种量转入100％麦芽汁培养基中，调节PH值为6.0，(1)生长阶段：接种后调节溶氧量DO≥20％，PH值5.6～6.0，温度27～29℃，培养8小时后，开始匀速流加补入100％麦芽汁，继续培养1～3小时至OD600≥9.0；(2)Cr3+富集培养阶段：①调节PH值到5.5～5.6，开始按补加速度1.0～2.0ml/min加入CrCl3·6H2O溶液，至Cr3+浓度达到0.10～0.15g/l发酵液时，仃止补加；②补加完Cr3+后，保持PH值在5.5～5.6，继续补加100％麦芽汁，补加体积为发酵始体积的30～50％，补加速度匀速递增，培养至麦芽汁全部补完；③麦芽汁补加完后，保持PH值在5.5～5.6，继续发酵，总发酵时间达40～50小时后，下罐；(三)离心、收集菌体：(1)将下罐菌体悬液离心收集菌体；(2)用灭菌后的超纯水清洗菌体数次，至湿菌体中基本上没有无机铬；(3)将湿菌体喷雾干燥，收集干菌粉，冷藏保存。