[发明专利]肉、奶牛B超活体取卵方法

摘要

本发明涉及一种肉、奶牛B超活体取卵方法，属生物技术领域。本方法的吸卵真空泵的压力为50－90mmHg，吸卵液为含0.5－1％，青－链霉素和5－10IU肝素的磷酸缓冲液，洗卵液为含5－12％，BCS的磷酸缓冲液和改良的基础培养液－Hepes液；采卵频率为1次/4天/头；穿刺对象为所有直径≥2mm的卵泡；取1－3级的卵母细胞分装、备用；对7－8岁的供体经产牛按程序注射等量的外源性FSH，总量为30－55μg；对≥14岁的老年牛按程序肌肉注射总量为150－200μg的外源性FSH，以提高卵母细胞发育潜能。本发明的优点在于，从活体可重复、无损伤获取卵母细胞；≥2mm直径卵泡作为穿刺对象和每4天1次的取卵频率保证了卵母细胞的质量和发育同步性；用外源性FSH诱导可提高卵母细胞的发育潜能；本方法的取卵效果佳。

主权项

1、肉、奶牛B超活体取卵方法，包括术前准备、卵巢及卵泡观察、取卵、卵母细胞检出和分类步骤，其特征在于：(1)吸卵真空泵的压力为50-90mmHg，吸卵液为含0.5-1％青-链霉素和5-10IU肝素的磷酸缓冲液，洗卵液为含5-12％BCS的磷酸缓冲液和改良的基础培养液-Hepes液；(2)采卵频率为1次/4天/头；(3)穿刺对象为所有直径≥2mm的卵泡；收集的卵母细胞采用4级分类，取1-3级的卵母细胞分装、备用；(4)对7-8岁的供体经产牛按程序在间隔3天里每天分2次肌肉注射等量的外源性FSH，总量为30-55μg；对≥14岁的老年牛按程序在取卵前4天每天按总量4∶3∶2∶1的比例肌肉注射总量为150-200μg的外源性FSH，以提高卵母细胞发育潜能。