[发明专利]用胚状体进行紫花苜蓿快速无性繁殖的方法

摘要

本发明涉及植物繁殖方法，特别是一种用胚状体进行紫花苜蓿快速无性繁殖的方法。以下胚轴作为外植体，以UM+2，4－D(2－3mg/L)+KT(0.25－0.5mg/L)作为初生胚诱导和继代培养基，将初生胚转入MSO培养基中诱导和继续次生胚形成。次生胚个体肥大，子叶饱满，在改良的SH培养基中发育成完整植株的比例高(78％)。该方法周期短，成本低，可大大提高紫花苜蓿组织培养中的成苗效率，年有效增值率最低为：1∶338－450。

主权项

1、一种用胚状体进行紫花苜蓿快速无性繁殖的方法，其特征在于包括以下步骤：1)无菌苗的培养：将苜蓿种子用75％酒精消毒10分钟，再用0.1％升汞消毒10分钟后，水洗5遍，放入无激素的1/2MS培养基中，光周期14小时/天，光强3000Lux，室温25-27℃条件下培养4-5天；2)初生胚状体的诱导和继代：取无菌苗的下胚轴放入PH值5.7，UM+2，4-D(浓度为2-3mg/L)+KT(浓度为0.25-0.5mg/L)+3％蔗糖+0.8％琼脂培养基中培养，光周期14小时/天，光强3000Lux，室温25-27℃条件下培养25天左右，挑选初生胚状体转入MSO+3％蔗糖+0.8％琼脂的和继代进行次生胚状体的诱导和继代；3)次生胚状体的诱导和继代：将初生胚状体转入PH值5.7，MSO+3％蔗糖+0.8％琼脂的次生胚诱导和继代培养基中培养，光周期14小时/天，光强3000Lux，室温25-27℃条件下培养10天左右；4)完整植株的形成：将次生胚转入无激素改良SH+2％蔗糖+0.7％琼脂的成苗培养基中，PH值5.7，光周期14小时/天，光强3000Lux，室温25-27℃条件下培养20-35天；5)试管苗的移栽与成活：松开培养瓶的封口膜进行练苗一星期，取完整植株苗用流水洗去培养基后转入装有蛭石的营养钵中，保鲜膜封口后放入阴凉处10天，打开封口膜，30天后转入大田中种植。