[发明专利]提取细菌人工染色体(BAC)质粒的方法无效

专利信息
申请号: 200410013735.4 申请日: 2004-04-30
公开(公告)号: CN1570099A 公开(公告)日: 2005-01-26
发明(设计)人: 王志伟;顾雪锋;李荣田;韩俊;郭德栋 申请(专利权)人: 黑龙江大学
主分类号: C12N15/10 分类号: C12N15/10;C12N15/63;C12N15/64;C12N1/21
代理公司: 哈尔滨市松花江专利商标事务所 代理人: 张伟
地址: 150080黑龙*** 国省代码: 黑龙江;23
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摘要: 提取细菌人工染色体(BAC)质粒的方法,它涉及一种提取BAC质粒的方法。本发明的方法为,在常规的提取过程中,所使用溶液II的配方原料为NaOH、SDS和dd.H2O,其中NaOH的摩尔浓度为0.4N,SDS浓度为0.8%,溶液III的配方原料为5M醋酸钾60ml、冰醋酸28.5ml、H2O11.5ml。本发明溶液II的溶液III的改变,极大的提高了提取BAC DNA的效率;本发明在提取过程中采用TB培养基,产量得到了大大增加;本发明的整个过程只使用一只离心管,减少了人力、财力、物力,节约了提取时间;应用本发明的方法提高了产率,缩短了工作时间,利于推广应用。
搜索关键词: 提取 细菌 人工 染色体 bac 质粒 方法
【主权项】:
1、一种提取细菌人工染色体(BAC)质粒的方法,其特征在于它包括向离心管中加入细菌培养基、离心、按时间顺序加入溶液I、溶液II、溶液III、异丙醇的常规步骤,其特征在于所使用溶液II的配方原料为NaOH、SDS和dd.H20,其中NaOH的摩尔浓度为0.4M,SDS浓度为0.8%;溶液III的配方原料为每100ml溶液III含5M醋酸钾60ml、冰醋酸28.5ml、H2O11.5ml,最后溶液III的pH值为4.8。
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