[发明专利]一种甲状腺过氧化物酶抗体磁分离酶联免疫检测方法

摘要

本发明提供了一种人甲状腺过氧化物酶抗体磁分离酶联免疫检测方法，其检测步骤为：加样与免疫反应，洗涤，加入二抗酶标试剂，再洗涤，加入单磷酸酚酞底物溶液，终止显色，读取吸光值。本发明的优点在于：利用了重组人甲状腺过氧化物酶抗原包被免疫磁性微珠作为固相，并采用了碱性磷酸酶作为标记酶，大大提高了检测的灵敏度和准确性。对甲状腺疾病患者和正常人血清进行甲状腺过氧化物酶抗体的定量测定，结合其他临床症状就可以判断检查者是否患有自身免疫性甲状腺疾病。

主权项

1、一种人甲状腺过氧化物酶抗体磁分离酶联免疫检测方法，其特征在于：检测步骤为：a、加样与免疫反应：在平底试管中加入10-30μl血清样本标准品或质量控制血清，加入60-120μl 8-14mg/ml固相磁分离试剂，混匀后，37℃温育15-60分钟；b、洗涤：将平底试管放在磁分离器上分离2分钟，然后用圆周运动倒转分离器倒出上清液，把倒转的试管放在滤纸上，拍击分离器以除去挂壁液体，每管中加入清洗液100-500μl，充分混匀后，将平底试管放在磁分离器上分离2分钟，然后用圆周运动倒转分离器倒出上清液，把倒转的试管放在滤纸上，拍击分离器以除去挂壁液体；重复两次；c、加入二抗酶标试剂：在每一试管中加入碱性磷酸酶EC3.1.3.1连接的山羊抗人免疫球蛋白G抗体工作液30-120μl，混匀后，37℃温育15分钟；d、洗涤：同b步骤；e、加入单磷酸酚酞底物溶液：每管加入90-120μl单磷酸酚酞底物溶液，混匀后，37℃温育15-60分钟；f、终止显色：每管加入300-500μl碱性终止液，并放在磁分离器上分离5分钟以上；g、读取吸光值：在分光光度计上或使用磁酶免测定仪I上读取吸光值，波长为492nm/550nm。