[发明专利]单核苷酸多态性的鉴定

摘要

一种能够同时鉴定微生物体中目的核酸单核苷酸多态性及定量该目的核酸的方法。

主权项

1.一种可同时鉴定和定量微生物体中具有单核苷酸多态性的目的核酸的方法，其包括：提供第一探针及第二探针，其中该第一探针与该目的核酸的第一序列相同或互补，其包含与单核苷酸多态性相对应的碱基；其中该第二探针与该目的核酸的第二序列相同或互补，其不包含与单核苷酸多态性相对应的碱基；通过聚合酶链式反应复制扩增该目的核酸，以形成包含该第一序列及该第二序列的双链核酸；在反应液中将该核酸产物分别与该第一探针及第二探针杂交，以分别形成第一双链及第二双链，其中该第一探针共价结合于第一荧光标记，该第二探针共价结合于第二荧光标记，其中该第一荧光标记及该第二荧光标记中之一为荧光团供体，另一者为荧光团受体，使得当该第一探针及第二探针与该目的核酸杂交时，该荧光团供体与该荧光团受体处于邻近位置，且两者之间能够进行荧光共振能量转移；加热该反应液，使温度高于该第一探针及其互补序列所形成的双链核酸的解链温度；鉴定该目的核酸中的单核苷酸多态性，其中以激发光照射该荧光团供体，并测量该第一探针的荧光团受体所发出的荧光的变化量，该荧光变化量与其所升高的温度值成正比；通过测量该荧光团受体所发出的荧光来定量该目的核酸。