[发明专利]一种质粒DNA提取和纯化方法及生产工艺

摘要

一种从原核生物中提取和纯化质粒DNA的方法及其生产工艺，其方法含有原核生物菌液浓缩、菌体裂解、质粒DNA分离和质粒DNA纯化；其生产工艺是：过滤分离法菌体、在溶菌酶作用下热裂解菌体、膜过滤法分离和纯化质粒DNA。本发明的技术效果：利用本发明提供的方法及生产工艺不仅能够有效的提高质粒提取产量和质量，而且制备过程简单、易于实施。

主权项

1、一种将发酵后工程菌进行浓缩、高温裂解、质粒分离和纯化的大规模制备和生产方法，其中包括如下步骤：1)对发酵后工程菌进行浓缩，收集浓缩菌液。2)加入溶菌液进行反应。3)上述反应在25～37℃温育10～60分钟而得原生质体。4)将上述原生质体溶液通过加热管使原生质体温度上升到50～80℃使其原生质彻底裂解。5)将裂解后的菌体通过400～1000目的滤膜分离上清液和裂解液中的菌体碎片及细菌染色体。6)通过对分离后的上清液加入适量的NaAc和异丙醇沉淀其核酸，并在200～400目滤膜中进行过滤分离出核酸沉淀物。7)通过70％乙醇清洗此核酸沉淀物。8)干燥此核酸沉淀物。8)加入适量的TE溶液进行溶解，而得到质粒DNA产物。